第一章 文献综述 | 第1-26页 |
·生物大分子分离与纯化研究概述 | 第12页 |
·色谱基本理论 | 第12-15页 |
·液相色谱中溶质的计量置换保留模型 | 第12-14页 |
·短柱理论 | 第14页 |
·分离模式 | 第14-15页 |
·简易型色谱柱 | 第15-17页 |
·蛋白质的变性与复性 | 第17-18页 |
·蛋白质的变性 | 第17页 |
·胍、脲变性剂的变性机理 | 第17-18页 |
·蛋白质的复性 | 第18页 |
·蛋白质的复性机理 | 第18-19页 |
·液相色谱法对蛋白质的复性 | 第19-21页 |
·二硫键的正确对接 | 第21-22页 |
·胰岛素复性研究意义 | 第22-23页 |
参考文献 | 第23-26页 |
第二章 疏水色谱法从猪心中纯化分离细胞色素-C | 第26-46页 |
·概述 | 第26-28页 |
·生化药物的制备 | 第26页 |
·细胞色素-C | 第26-28页 |
·实验部分 | 第28-31页 |
·仪器和设备 | 第28页 |
·试剂与材料 | 第28页 |
·实验方法 | 第28-31页 |
·猪心Cyt-C的提取 | 第28-29页 |
·柱子的装填 | 第29页 |
·经典吸附层析法纯化细胞色素C | 第29-30页 |
·色谱法分离纯化细胞色素C | 第30页 |
·含铁量的测定 | 第30-31页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第31页 |
·蛋白含量的测定-Bradford法 | 第31页 |
·结果与讨论 | 第31-44页 |
·经典吸附层析法 | 第31-32页 |
·用简易型疏水色谱柱对细胞色素C的纯化 | 第32-36页 |
·简易型疏水色谱柱对标准蛋白的色谱分离 | 第32页 |
·简易型疏水色谱柱对Cyt-C的分离 | 第32-36页 |
·纯度的检验 | 第36-39页 |
·反相色谱 | 第36-37页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第37-38页 |
·基质辅助激光解析飞行时间质谱 | 第38-39页 |
·Cyt-C质量回收率的测定 | 第39-40页 |
·铁含量的测定 | 第40页 |
·紫外图谱比较 | 第40-41页 |
·制备规模的扩大与发展前景 | 第41-44页 |
·大柱对标准蛋白的色谱分离 | 第41页 |
·大柱对Cyt-C的纯化分离 | 第41-43页 |
·应用前景 | 第43-44页 |
·结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-46页 |
第三章 体积排阻色谱法对还原变性胰岛素折叠特性的研究 | 第46-59页 |
·复性原理 | 第46-49页 |
·实验部分 | 第49-50页 |
·仪器和设备 | 第49页 |
·试剂与材料 | 第49页 |
·还原胍变,脲变Ins的配制 | 第49页 |
·用排阻色谱复性还原变性的Ins | 第49-50页 |
·反相色谱法检验复性结果 | 第50页 |
·稀释法 | 第50页 |
·结果与讨论 | 第50-57页 |
·还原变性Ins在等度SEC上的色谱行为 | 第51-53页 |
·三种流动相中还原变性Ins的折叠行为 | 第51-53页 |
·改变流动相中脲浓度对还原变性Ins的折叠行为的影响 | 第53页 |
·还原变性Ins在脲梯度复性中的色谱行为 | 第53-56页 |
·用反相色谱检验复性结果 | 第56-57页 |
·结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-59页 |
第四章 疏水色谱法对还原变性胰岛素折叠特性的研究 | 第59-70页 |
·复性原理 | 第59-61页 |
·蛋白分子中的疏水作用力 | 第59-60页 |
·疏水色谱的折叠机理 | 第60-61页 |
·实验部分 | 第61-63页 |
·仪器和设备 | 第61-62页 |
·试剂与材料 | 第62页 |
·还原胍变,脲变Ins的配制 | 第62页 |
·用疏水色谱法复性还原变性的Ins | 第62页 |
·反相色谱法检验复性结果 | 第62-63页 |
·稀释法 | 第63页 |
·结果与讨论 | 第63-68页 |
·流动相中GSH/GSSG的比率对还原变性Ins在疏水色谱上折叠行为的影响 | 第63页 |
·流动相中脲浓度对还原变性Ins在HIC上折叠行为的影响 | 第63-66页 |
·流动相中盐浓度对还原变性Ins在HIC上折叠行为的影响 | 第66-67页 |
·用反相色谱检验稀释法与疏水色谱法复性结果 | 第67-68页 |
·结论 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-70页 |
第五章 离子交换色谱法对还原变性胰岛素折叠特性的研究 | 第70-83页 |
·复性原理 | 第70-71页 |
·实验部分 | 第71-72页 |
·仪器和设备 | 第71页 |
·试剂与材料 | 第71-72页 |
·还原胍变,脲变Ins的配制 | 第72页 |
·用离子交换色谱法复性还原变性的Ins | 第72页 |
·稀释法 | 第72页 |
·紫外吸收光谱(UV)和荧光光谱(FR) | 第72页 |
·结果与讨论 | 第72-81页 |
·进样量的选择 | 第72-74页 |
·流动相组成对还原变性Ins在离子交换色谱上色谱行为的影响 | 第74-76页 |
·流动相A液的影响 | 第74页 |
·洗脱剂的影响 | 第74-75页 |
·流动相中添加GSH/GSSG对还原变性胰岛素色谱行为的影响 | 第75-76页 |
·流动相中添加脲对还原变性胰岛素色谱行为的影响 | 第76页 |
·pH值对还原变性Ins在离子交换色谱上色谱行为的影响 | 第76-78页 |
·复性效果检验 | 第78-80页 |
·紫外吸收光谱 | 第78-79页 |
·荧光扫描 | 第79-80页 |
·稀释法与色谱法比较 | 第80-81页 |
·结论 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-83页 |