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转ScMV-CP基因甘蔗抗病的分子基础及环境安全性评价
 
     论文目录
 
中文摘要第1-13页
英文摘要第13-16页
第一章 文献综述第16-32页
 1. 甘蔗花叶病的发生危害与基因工程育种第16-18页
   ·甘蔗花叶病的发生危害第16页
   ·马铃薯Y病毒属侵染植物的细胞病理特征第16-17页
   ·植物病毒侵染对光合作用的影响第17页
   ·甘蔗抗花叶病毒基因工程育种第17-18页
 2. 植物抗病的生理生化基础第18-22页
   ·活性氧在植物抗病的作用第19-21页
   ·苯丙烷代谢与植物抗病的关系第21-22页
 3. 植物抗病的分子基础第22-25页
   ·cDNA microarray在植物与病原互作研究中的应用第22-24页
   ·差异蛋白质组学在植物与病原互作研究中的应用第24-25页
 4. 转基因植物的安全性第25-30页
   ·转基因作物的安全性问题第25-26页
   ·转基因植物中外源基因的漂移第26页
   ·转基因植物对生物多样性的影响第26-27页
   ·转基因植物抗性丧失第27页
   ·抗病毒转基因植物的风险第27-28页
   ·转基因作物对土壤微生态环境的影响第28-29页
   ·标记基因的安全性问题第29页
   ·展望第29-30页
 5. 本研究的目的、意义及主要研究内容第30-32页
   ·目的及意义第30页
   ·主要研究内容及技术路线第30-32页
第二章 转ScMV-CP基因甘蔗抗病稳定性及工农艺性状表现第32-41页
 1 材料与方法第32-34页
   ·供试材料第32-33页
   ·方法第33-34页
     ·转基因材料种植第33页
     ·花叶病发病率调查第33页
     ·甘蔗基因组 DNA提取第33页
     ·转基因甘蔗ScMV-CP基因的PCR检测第33页
     ·甘蔗农艺性状调查第33-34页
 2 结果与分析第34-40页
   ·转基因甘蔗的抗病稳定性第34-35页
   ·第三代转基因甘蔗的农艺性状表现第35-36页
   ·第四代转基因甘蔗环境释放的工农艺性状表现第36-39页
     ·转基因甘蔗与非转基因生长速度比较第37页
     ·第四代转基因甘蔗在福建的农艺性状表现第37-38页
     ·第四代转基因甘蔗在福建的品质性状表现第38-39页
     ·第四代转基因甘蔗在浙江的工农艺性状表现第39页
   ·转基因无性系的综合评价第39-40页
 3 讨论第40-41页
第三章 转 ScMV-CP基因甘蔗增产的光合基础第41-54页
 1 材料与方法第41-44页
   ·材料第41页
   ·方法第41-44页
     ·甘蔗叶片病毒间接ELISA鉴定第41页
     ·超薄切片制备及电镜观察第41-42页
     ·叶片叶绿体全蛋白双向电泳及质谱分析第42-44页
       ·叶绿体全蛋白的提取第42页
       ·蛋白裂解第42页
       ·蛋白质含量测定第42页
       ·第一向等电聚焦第42页
       ·第二向SDS-PEGE第42-43页
       ·染色第43页
       ·差异蛋白点的质谱分析第43-44页
     ·光合参数测定第44页
     ·叶绿素含量测定第44页
     ·PEPC酶活性测定第44页
     ·叶片Mg~(2+)-ATP酶和Ca~(2+)-ATP酶活性测定第44页
     ·蛋白质含量测定第44页
   ·数据整理与分析第44页
 2. 结果与分析第44-50页
   ·转ScMV-CP基因甘蔗和非转基因甘蔗叶片细胞超微结构比较第44-45页
   ·转基因甘蔗与未转基因甘蔗叶绿体蛋白的差异表达第45-49页
     ·转基因甘蔗与未转基因甘蔗叶绿体蛋白双向电泳图谱比较第45-48页
     ·转基因甘蔗与未转基因甘蔗叶绿体差异蛋白的质谱分析第48-49页
   ·转基因甘蔗与非转基因甘蔗叶片光合特性的比较第49-50页
 3. 讨论第50-54页
第四章 转ScMV-CP基因甘蔗抗花叶病的的生理生化基础第54-70页
 1 材料与方法第54-57页
   ·材料第54页
   ·接种方法第54-55页
   ·测定方法第55-57页
     ·水杨酸(SA)含量测定第55页
     ·H_2O_2含量测定第55页
     ·过氧化物酶(POD)活性测定第55页
     ·超氧化物歧化酶(SOD)活性测定第55-56页
     ·过氧化氢酶(CAT)活性测定第56页
     ·抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性测定第56页
     ·丙二醛(MDA)含量测定第56页
     ·苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性测定第56页
     ·多酚氧化酶(PPO)活性测定第56-57页
     ·总酚和类黄酮含吸测定第57页
   ·数据分析第57页
 2 结果与分析第57-67页
   ·SA与转基因甘蔗的抗病性关系分析第57-58页
     ·转基因甘蔗病毒接种后SA含量的变化第57-58页
   ·转基因甘蔗接种后活性氧代谢的变化第58-64页
     ·过氧化氢(H_2O_2)含量第58-59页
     ·SOD比活性变化第59页
     ·POD活性变化第59-60页
     ·CAT活性变化第60-61页
     ·APX活性变化第61页
     ·丙二醛(MDA)含量变化第61-62页
     ·不同无性系接种后游离SA、H_2O_2以及相关的酶之间的关系分析第62-64页
   ·转基因甘蔗对PAL代谢的影响第64-67页
     ·RAL活性变化第64-65页
     ·PPO活性变化第65页
     ·总酚含量变化第65-66页
     ·类黄酮含量变化第66-67页
 3. 讨论第67-70页
第五章 转ScMV-CP基因甘蔗抗花叶病的分子基础第70-96页
 1. 材料与方法第70-79页
   ·材料第70页
   ·病毒接种及取样第70-71页
   ·生化试剂第71页
   ·cDNA芯片杂交第71-75页
   ·cDNA克隆测序及序列分析第75页
   ·甘蔗Myb基因编码区的分离克隆第75-77页
   ·目的片段测序和分析第77页
   ·实时PCR半定量法分析甘蔗MYB基因表达第77-79页
   ·叶片全蛋白的双向电泳及质谱分析第79页
 2 结果与分析第79-92页
   ·RNA的质量分析第79页
   ·ScMV诱导表达的cDNA基因芯片分析第79-83页
   ·甘蔗MYB基因的克隆与表达分析第83-89页
     ·MYB基因的克隆第83页
     ·甘蔗MYB基因核苷酸序列及分析第83-87页
     ·甘蔗MYB基因在表达分析第87-89页
   ·转基因甘蔗与未转基因甘蔗叶片全蛋白的差异表达第89-92页
     ·转基因甘蔗与未转基因甘蔗叶片全蛋白的双向电泳图谱比较第89-91页
     ·转基因甘蔗与未转基因甘蔗叶片差异蛋白的质谱分析第91-92页
 3. 讨论第92-96页
   ·转基因甘蔗抗病的分子基础第92-93页
   ·Myb转录因子的片段克隆及表达分析第93-94页
   ·转基因甘蔗抗病的蛋白基础第94-96页
第六章 转ScMV-CP基因甘蔗环境安全性评价第96-112页
 1 材料与方法第97-98页
   ·材料种植及土样采集第97页
   ·方法第97-98页
     ·田间主要害虫为害情况调查第97页
     ·土壤微生物总数采用平板培养法第97页
     ·土壤酶活性测定第97页
     ·土壤pH值和电导率测定第97页
     ·土壤微生物多样性测定第97-98页
     ·土壤总DNA提取第98页
     ·CP基因的PCR检测第98页
   ·数据分析第98页
 2 结果与分析第98-110页
   ·转基因甘蔗对田间非靶标害虫的影响第98-99页
   ·转基因甘蔗外源CP基因的土壤水平转移第99-100页
   ·转基因甘蔗对土壤可培养微生物数量的影响第100-102页
   ·根际土壤卡那霉素抗性微生物数量的比较第102-103页
   ·转基因甘蔗对根际土壤酶活性的影响第103-106页
   ·转基因甘蔗对土壤pH值和土壤电导率的影响第106-107页
   ·转基因甘蔗对土壤细菌多样性的影响第107-110页
 3. 讨论第110-112页
结论第112-119页
 1. 转基因甘蔗抗病稳定性和增产基础第112-114页
   ·转基因甘蔗抗病稳定性和农艺性表现第112-113页
   ·转基因甘蔗增产的光合基础第113-114页
 2. 转基因甘蔗抗病的分子生理基础第114-117页
   ·转基因甘蔗抗病的生理生化基础第114-115页
   ·转基因甘蔗抗病的分子基础第115页
   ·转基因甘蔗抗病的可能机制初探第115-117页
 3. 转基因甘蔗的环境安全性评价第117页
 4. 展望第117-118页
 5. 在学期间发表的论文第118-119页
参考文献第119-137页
附录第137-142页
致谢第142页

 
 
论文编号BS1461109,这篇论文共142
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