摘要 | 第7-8页 |
abstract | 第8页 |
第一章 绪论 | 第13-32页 |
1.1 帕金森氏病概述 | 第13-16页 |
1.1.1 帕金森氏病的背景介绍 | 第13页 |
1.1.2 帕金森氏病与α-synuclein | 第13-16页 |
1.2 果蝇概述 | 第16-22页 |
1.2.1 模式生物果蝇的背景简介 | 第16-17页 |
1.2.2 果蝇的GAL4/UAS双元系统 | 第17-19页 |
1.2.3 显微注射转基因技术 | 第19-20页 |
1.2.4 PD果蝇模型 | 第20-22页 |
1.3 树突状细胞因子(dcf1) | 第22-32页 |
1.3.1 人dcf1的结构、转录和分布 | 第22-25页 |
1.3.2 人源dcf1蛋白的组成和特性 | 第25-27页 |
1.3.3 人源dcf1蛋白质结构分析 | 第27-28页 |
1.3.4 dcf1的系统生物学分析 | 第28-29页 |
1.3.5 dcf1的研究进展 | 第29-32页 |
第二章 实验材料和方法 | 第32-56页 |
2.1 实验材料 | 第32-37页 |
2.1.1 仪器 | 第32-33页 |
2.1.2 实验果蝇 | 第33-34页 |
2.1.3 实验试剂与耗材 | 第34-35页 |
2.1.4 培养基以及试剂配制 | 第35-37页 |
2.2 实验方法 | 第37-56页 |
2.2.1 果蝇的饲养 | 第37-38页 |
2.2.2 处女蝇的收集 | 第38页 |
2.2.3 elav-GAL4-UAS-α-synuclein果蝇品系的构建 | 第38-40页 |
2.2.4 w1118果蝇卵的收集和排列 | 第40-41页 |
2.2.5 显微注射操作以及后续操作 | 第41页 |
2.2.6 PD果蝇模型的构建 | 第41-42页 |
2.2.7 果蝇基因型鉴定 | 第42-44页 |
2.2.8 果蝇幼虫爬行实验 | 第44-45页 |
2.2.9 果蝇寿命实验 | 第45-46页 |
2.2.10 果蝇爬壁实验 | 第46-47页 |
2.2.11 果蝇脑多巴胺能神经元染色 | 第47-48页 |
2.2.12 果蝇电生理 | 第48-51页 |
2.2.13 果蝇脑α-synuclein蛋白及α-synuclein129位磷酸化蛋白的免疫荧光染色 | 第51页 |
2.2.14 果蝇脑组织蛋白提取 | 第51-52页 |
2.2.15 免疫蛋白印迹 | 第52-53页 |
2.2.16 原核细胞的蛋白表达及纯化 | 第53-56页 |
第三章 实验结果 | 第56-89页 |
3.1 PD相关果蝇品系的构建与鉴定 | 第56-59页 |
3.2 dcf1的表达对于PD果蝇幼虫爬行距离及轨迹的影响 | 第59-61页 |
3.3 共表达dcf1使PD果蝇模型幼虫神经肌肉接头生长发育正常化 | 第61-64页 |
3.4 果蝇中枢神经系统中过表达dcf1延长PD果蝇模型的寿命 | 第64-68页 |
3.5 过表达dcf1缓解PD果蝇模型运动能力下降的症状 | 第68-70页 |
3.6 过表达dcf1抑制了PD果蝇突触的损伤 | 第70-72页 |
3.7 过表达dcf1延缓抑制了PD果蝇模型大脑背中侧(DM)多巴胺能神经元的衰退 | 第72-75页 |
3.8 共表达dcf1使α-synuclein在果蝇大脑中积聚 | 第75-77页 |
3.9 Dcf1与α-synuclein共定位于Hek293t细胞 | 第77-80页 |
3.10 Dcf1降低在Hek293t中过表达α-synuclein的蛋白表达水平 | 第80-83页 |
3.11 Dcf1降低果蝇脑中α-syn的蛋白水平 | 第83-85页 |
3.12 Dcf1能够在体外降解α-synuclein蛋白 | 第85-89页 |
第四章 讨论与展望 | 第89-93页 |
参考文献 | 第93-99页 |
研究成果 | 第99-100页 |
致谢 | 第100-101页 |