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家蚕ATG3/ATG8蛋白在细胞自噬中亚细胞定位的初步研究
 
     论文目录
 
摘要第3-6页
abstract第6-9页
1 前言第14-28页
    1.1 自噬的分类第14-16页
    1.2 自噬小体的形成第16-18页
    1.3 昆虫中细胞自噬的调控第18-22页
        1.3.1 20E对自噬的调控第18-19页
        1.3.2 营养和能量信号对自噬的调控第19-20页
        1.3.3 乙酰化修饰对自噬的调控第20-22页
    1.4 ATG3/ATG8蛋白的相关研究进展第22-25页
        1.4.1 ATG3蛋白的相关研究进展第22-23页
        1.4.2 ATG8蛋白的相关研究进展第23-25页
    1.5 本论文研究目的、内容及意义第25-27页
        1.5.1 研究目的第25-26页
        1.5.2 研究内容第26-27页
        1.5.3 研究意义第27页
    1.6 技术路线第27-28页
2 材料与方法第28-52页
    2.1 实验材料第28-34页
        2.1.1 实验昆虫、细胞、菌株及质粒第28页
        2.1.2 常用药品及试剂第28-29页
        2.1.3 实验所用酶类第29-30页
        2.1.4 生物试剂盒第30页
        2.1.5 抗体第30-31页
        2.1.6 主要仪器及设备第31-32页
        2.1.7 常用溶液配制第32-34页
    2.2 实验方法第34-52页
        2.2.1 组织免疫荧光染色(Immunfluorescent staining)第34页
        2.2.2 蛋白质免疫印迹实验(Western blot)第34-36页
        2.2.3 RNA干扰第36-38页
        2.2.4 CRISPR/Cas9基因敲除第38-47页
        2.2.5 质粒小量抽提第47-48页
        2.2.6 Lysotracker-Red staining第48页
        2.2.7 透射电子显微镜(Transmission electron microscope, TEM)第48页
        2.2.8 细胞免疫荧光染色第48-49页
        2.2.9 细胞转染实验第49-50页
        2.2.10 细胞核质分离实验第50-51页
        2.2.11 细胞免疫沉淀实验第51-52页
    2.3 数据分析第52页
3 实验结果第52-71页
    3.1 BmATG3/BmATG8蛋白抗体验证及发育表达模式第52-55页
        3.1.1 BmATG3/BmATG8蛋白抗体验证第52-53页
        3.1.2 BmATG3/BmATG8蛋白发育表达模式第53-55页
    3.2 BmAtg3/BmAtg8在家蚕脂肪体细胞自噬中的功能研究第55-61页
        3.2.1 杆状病毒超表达BmAtg3/BmAtg8后,自噬水平上调第55-56页
        3.2.2 RNA干扰BmAtg3/BmAtg8后,自噬水平下调第56-58页
        3.2.3 CRISPR/Cas9介导敲除BmAtg3后,自噬水平下调第58-60页
        3.2.4 CRISPR/Cas9介导敲除BmAtg3对家蚕生长发育的影响第60-61页
    3.3 20E及饥饿对BmATG3/BmATG8蛋白亚细胞定位的研究第61-66页
        3.3.1 20E诱导BmN细胞内源BmATG3/BmATG8蛋白在细胞质中聚集第61-63页
        3.3.2 饥饿诱导BmN细胞内源BmATG3/BmATG8蛋白在细胞质中聚集第63-64页
        3.3.3 20E诱导BmN细胞外源BmATG3/BmATG8蛋白在细胞质中聚集第64-65页
        3.3.4 饥饿诱导BmN细胞外源BmATG8蛋白在细胞质中聚集第65-66页
    3.4 BmATG3/BmATG8蛋白在细胞核、质中分布变化的研究第66-68页
        3.4.1 本底水平下BmATG3/BmATG8蛋白主要分布于细胞核第66-67页
        3.4.2 20E及饥饿处理BmN细胞,诱导BmATG3/BmATG8蛋白核质分布发生变化第67-68页
    3.5 乙酰化修饰对家蚕细胞自噬的影响第68-71页
        3.5.1 TSA处理BmN细胞增加蛋白乙酰化水平第68-70页
        3.5.2 TSA处理BmN细胞,自噬水平下调第70-71页
4 全文讨论与结论第71-74页
    4.1 BmATG3/BmATG8蛋白抗体验证及发育表达模式第71-72页
    4.2 BmAtg3/BmAtg8在家蚕脂肪体细胞自噬中的功能研究第72-73页
    4.3 20E及饥饿对BmATG3/BmATG8蛋白亚细胞定位的研究第73页
    4.4 BmATG3/BmATG8蛋白在细胞核、质中分布变化的研究第73页
    4.5 乙酰化修饰对家蚕细胞自噬的影响第73-74页
5. 创新性第74页
6. 展望第74-75页
致谢第75-77页
本论文研究受到以下项目的资助第77-78页
参考文献第78-84页
附录第84页

 
 
论文编号BS4076609,这篇论文共84
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