摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-29页 |
·基因工程中,外源基因的表达差异性以及原因 | 第9-14页 |
·转基因表达差异性 | 第9-10页 |
·转基因拷贝数,RNA沉默引起外源基因表达差异 | 第10-11页 |
·位置效应引起外源基因表达差异 | 第11-14页 |
·克服外源基因表达差异的方法 | 第14-21页 |
·利用单拷贝株系或PTGS突变体减少外源基因表达差异 | 第14-15页 |
·利用MARs减少外源基因表达差异 | 第15-19页 |
·利用绝缘子减少外源基因表达差异 | 第19-21页 |
·绝缘子 | 第21-29页 |
·绝缘子的分类 | 第22-23页 |
·与绝缘子有关的反式作用因子 | 第23-26页 |
·绝缘子的功能 | 第26-27页 |
·绝缘子的作用机制 | 第27-29页 |
第二章 材料和方法 | 第29-38页 |
·实验材料 | 第29页 |
·原始载体 | 第29页 |
·入门载体的构建 | 第29-32页 |
·引物设计 | 第29-30页 |
·PCR及产物回收 | 第30-31页 |
·Entry反应 | 第31-32页 |
·转化及阳性克隆鉴定 | 第32页 |
·目的载体的构建 | 第32-34页 |
·表达载体的构建 | 第34-35页 |
·转基因和筛选 | 第35-36页 |
·电转化 | 第35页 |
·转基因 | 第35页 |
·筛选 | 第35-36页 |
·种子萌发和表型观察 | 第36页 |
·组织化学染色和GUS定量分析 | 第36-37页 |
·组织化学染色 | 第36页 |
·GUS定量分析 | 第36-37页 |
·EGFP检测 | 第37-38页 |
第三章 结果和分析 | 第38-50页 |
·带有gypsy绝缘子的T-DNA插入载体的构建 | 第38页 |
·gypsy绝缘子增强拟南芥中不同启动子驱动的报告基因的表达 | 第38-40页 |
·Su(Hw)蛋白的共表达进一步减少转基因表达差异 | 第40-44页 |
·gypsy-Su(Hw)体系并不改变PIN基因家族和AFB基因家族的启动子特异性 | 第44-46页 |
·gypsy绝缘子能提高位于绝缘区外的选择标记基因的表达 | 第46-50页 |
第四章 讨论 | 第50-53页 |
参考文献 | 第53-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
已发表文章 | 第67页 |