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TGEV S基因B和C抗原位点片段的原核表达及5核酸探针制备
 
     论文目录
 
中文摘要第1-9页
外文摘要第9-11页
1 引言第11-25页
   ·TGEV生物学性状第11-12页
   ·TGEV基因组及其编码蛋白第12-17页
     ·基因组结构第12-13页
     ·基因表达方式第13-14页
     ·编码的蛋白及其功能第14-17页
   ·TGEV的抗原性和变异性第17-18页
   ·TGEV与PRCV分子水平差异第18-20页
   ·猪传染性胃肠炎分子生物学诊断研究进展第20-24页
     ·核酸探针杂交技术检测TGE0第21-22页
     ·聚合酶链式反应(PCR)检测TGE0第22-23页
     ·限制性酶切片段长度多态性(RFLP)分析TGE0第23-24页
   ·研究目的与意义第24-25页
2 材料与方法第25-35页
   ·实验材料第25-26页
     ·病毒与细胞第25页
     ·质粒与菌种第25页
     ·扩增引物第25页
     ·主要试剂第25-26页
     ·主要仪器第26页
   ·实验方法第26-35页
     ·TGEV增殖第26-27页
     ·TGEV总RNA的提取第27页
     ·ts片段的克隆及序列分析第27-29页
     ·ts片段在GST原核表达系统中的表达第29-31页
     ·tp片段的体外扩增及纯化第31-32页
     ·tp片段的纯度测定、浓度测定与标记第32-33页
     ·探针tp标记效率的检测第33-34页
     ·探针检测样品的初步应用第34-35页
3 实验结果第35-45页
   ·IBR细胞接种TGEV前后显微镜下观察对比第35页
   ·TGEV总RNA的提取与cDNA的合成第35-36页
   ·含有B和C抗原位点片段ts克隆、序列分析及原核表达第36-42页
     ·片段ts PCR扩增结果第36页
     ·重组pMD18-T-ts质粒的鉴定结果第36-37页
     ·ts片段碱基序列测定及同源性的比较第37-38页
     ·ts片段氨基酸序列比较及分析结果第38-39页
     ·ts片段与TGEV其它毒株已知序列同源树分析第39页
     ·重组质粒pGEX-6P-ts的鉴定第39-40页
     ·含重组质粒pGEX-6P-ts菌体诱导及SDS-PAGE鉴定第40-41页
     ·优化表达条件后表达蛋白的SDS-PAGE分析第41-42页
     ·B和C抗原位点片段蛋白(TS)表达含量的分析第42页
   ·核酸探针的制备及应用第42-45页
     ·tp片段的PCR扩增结果第42-43页
     ·片段tp浓度及纯度的测定第43页
     ·核酸探针tp标记效率检测结果第43页
     ·核酸探针tp检测样品结果第43-45页
4 讨论第45-48页
   ·ts片段的原核表达第45-46页
     ·ts基因片段的克隆第45页
     ·表达系统的选择第45-46页
     ·表达载体的选择第46页
   ·核酸探针的制备第46-48页
     ·探针片段的选择第47页
     ·探针的制备第47-48页
5 结论第48-49页
参考文献第49-55页
附录第55-59页
攻读硕士期间发表的学术论文第59-60页
致谢第60页

 
 
论文编号BS920209,这篇论文共60
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