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湖南烟草青枯病菌生理小种测定
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【摘 要】对来自湖南各烟区烟草青枯病43个分离菌株选择了10个致病性强的病珠,接种到烟草青枯病菌生理小种鉴别寄主上,都能侵染烟草、番茄、茄子、马铃薯、花生,表明所测菌株属于1号生理小种,其中致病力强的菌株为Ps714,Ps711,Ps707,Ps729,Ps735。分别分布在桂阳、蓝山、宁远、桑植、芷江等地。 【关键词】烟草 青枯病菌 生理小种 测定 利用抗病品种是防治烟草青枯病的一项根本措施。在烟草抗青枯病育种工作中,首先要了解各地烟草青枯病菌不同的生理小种和菌株的致病性强弱。在青枯病的品种抗性资源和育种后代材料抗病鉴定时,需要选用致病力强的青枯菌菌株进行接种测定,明确新品种抗病性,以便有目的地推广应用新品种。在了解烟草青枯病菌致病性及生物型[1]基础上,笔者研究了湖南省烟草青枯病菌致病性分化情况,现将结果报道如下。 1 材料与方法 1.1 供试菌株 从湖南省内各烟区采集病害标样,分离纯化后,获得纯培养菌株43个(表1)。 将分离的43个菌株分别移至含有10-4的红四氮唑的蛋白胨乳粉琼脂培养基上监测,获得致病菌株17个。并从中选择毒性强的菌株10个 (Ps705,Ps707,Ps711,Ps713,Ps714,Ps721,Ps729,Ps732,Ps735,Ps750)作测定生理小种用。 将10个供试菌株分别移至蛋白胨乳粉斜面培养基上(蛋白胨10g,葡萄糖10g,乳粉1g,琼脂18g,蒸馏水1000ml,PH7.0~7.4,置30℃恒温下培养48h。 1.2 鉴别寄主和育苗方法 鉴别寄主:烟草(K326),番茄(早丰),茄子(湘早茄1号),马铃薯(市售品种),花生(大粒子)。 采用常规方法播种育苗。培养土经福尔马林液灭菌。烟草、番茄、茄子先播种育苗,长有3~4片叶时移栽到盛有消毒土的瓦钵中,每钵3株;花生直接播入瓦钵中,每钵4~5粒种子。每个寄主育苗4钵。马铃薯分期栽种于土中。待各种寄主植物苗长到6~7叶时接菌。 采用菌液注茎接种和注叶接种两种方法。接种菌液的浓度为3×108cfu/ml。注茎接种时从各寄主植物茎基部注入菌液1ml。每一菌株接种10株。注叶接种时从叶片近侧脉处将菌株注入叶片上下表皮之间,每个叶片接种2~3点,每种寄主植物接种4~5片叶。另用无菌水接种各鉴别寄主作对照。注茎、注叶接种后,均用吸水脱脂棉花团保温。接种后将各寄主植物置于30~32℃的温室里,每天定时喷水使棉花团湿润,让其发病。
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