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烤烟叶片发育过程中类胡萝卜素类物质的反相高效液相色谱法测定研究
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摘 要 研究了反相高效液相色谱测定烤烟叶片发育过程中类胡萝卜素类物质的方法。烤烟叶片中类胡萝卜素用含0.1％BHT的90％丙酮振荡萃取后，加入0.1g醋酸铅，4℃低温离心5分钟（10,000rpm），剔除溶液中蛋白质，以C18反相柱为固定相，甲醇：异丙醇（1：1）－超纯水为流动相测定。方法标准回收率为91.77%-102.8%，RSD为3.457%-0.372%。用该方法研究了烤烟发育过程中类胡萝卜素变化规律。
关键词 烤烟叶片 类胡萝卜素 反相高效液相色谱法 测定
类胡萝卜素是存在于植物和微生物中的脂溶性色素，通常是指C40的碳氢化合物（胡萝卜素）和它们的氧化衍生物（叶黄素）两大类色素的总称。类胡萝卜素在植物叶绿体光合作用中起着重要作用，它们是光合作用中光传导途径和光反应中心的重要结构成分，担当叶绿体光和天线的辅助色素，帮助叶绿体吸收光能；另一方面，它们在高温、强光下能通过叶黄素循环，以非辐射的方式耗散光系统II（PSII）的过剩能量保护叶绿素免受破坏[1,2,3]。类胡萝卜素也是合成植物激素ABA的前体[4]。在烟叶中，类胡萝卜素作为许多重要致香成分的前提物对烟草香味品质的形成有重要作用[5]。烟草品质形成是烟草在品种、生态环境等综合条件下发育的结果。研究烟草发育过程中的类胡萝卜素变化具有重要意义[6]。类胡萝卜素的测定常用分光光度法和液相色谱法[7,8]。光度法准确性较差，传统液相色谱法样品前处理复杂，固相萃取法虽简化前处理，但成本较高[9,10]。我们研究了反相高效液相色谱法测定烟草发育过程中叶片类胡萝卜素类物质，采取简化样品前处理的方法，取得了较满意结果。
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