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寄生疫霉parA1基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

      摘 要 根据已报道的寄生疫霉(Phytophthora
    parasitica)parA1基因的序列设计引物,从4株寄生疫霉中国菌株(3株来自烟草,1株来自刺槐)中克隆到此基因并进行了重组表达。序列分析表明4株寄生疫霉parA1基因序列高度保守。对表达载体pET-30a(+)双酶切,构建表达parasiticein蛋白的表达载体pET-eli,用CaCl2法转化大肠杆菌(Escherichia
    coli)BL21,通过诱导在大肠杆菌中进行非融合表达,表达产物在烟草上引起过敏性反应。性质测定表明,表达产物有一定的耐热性,并对蛋白酶K敏感。
      关键词 寄生疫霉 Elicitins parA1基因 克隆 表达
      中图分类号:Q786     文献标识码:A        文章编号:
      Elicitins是Phytophthora和Pythium两个属的植物病原卵菌产生的、在烟草上引起过敏性反应(hypersensitive
    response,HR)和系统获得抗性(systemic acquired resistance,SAR)的一类胞外蛋白质的总称。Elicitins氨基酸序列高度相似和保守,前体蛋白质含19或20个氨基酸的信号肽,成熟蛋白质一般含98个氨基酸,分子量一般为10kD,少数elicitins略有不同[1]。Elicitins有α型(酸性)和β型(碱性)。寄生疫霉(Phytophthora
 
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