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人体骨髓基质干细胞冷冻干燥的探索性实验
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摘要：人体骨髓基质干细胞已成为组织工程、细胞移植和基因治疗等领域的重要研究对象,目前对它已有低温保存的研究,而通过冷冻干燥的方法对其进行保存国内外未见报导。实验尝试用冻干的方法来保存骨髓基质干细胞。文中选取海藻糖、ＰＶＰ、ＨＥＳ等作保护剂,应用差示扫描量热仪(ＤＳＣ)测量其结晶温度和玻璃化转变温度;随后对加入保护剂的细胞溶液进行冻干实验,并应用流式细胞仪对冻干样品复水后的细胞活性进行了测定,其中30%ＰＶＰ+20%海藻糖对细胞的保护效果较好,细胞成活率达到16.40%。
关键词：热工学 冷冻干燥 人体骨髓基质干细胞 冻干保护剂
1 前言
骨髓中含有两类组织成份:造血干细胞及其分化的子代细胞,和结缔组织(被称为基质)。在基质中除了存在着无成骨性的脂质细胞、网状细胞、内皮细胞和成纤维细胞外,还有一种独立的细胞系———基质干细胞(ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ,ＭＳＣｓ)。它是一种成纤维细胞样的梭型贴壁细胞,与造血干细胞一样具有多分化潜能,因而日益受到人们的关注。在特定的条件下,骨髓基质干细胞可以分化形成成骨细胞(ｏｓｔｅｏｂｌａｓｔｓ)、软骨细胞(ｃｈｏｎｄｒｏｃｙｔｅｓ)、成肌细胞(ｍｙｏｂｌａｓｔｓ)和神经细胞(ｎｅｕｒｏｃｙｔｅｓ)[1.2]。ＭＳＣｓ易于获得、特性稳定,是组织工程中理想的种子细胞,有很好的应用前景。它的广泛应用使其保存问题备受关注。目前,多采用-196℃的深低温保存[3],但液氮费和管理费用相当昂贵,所以有必要探索新的保存方法。
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