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一种人硫氧还蛋白基因修饰肝细胞的制备
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【中医学小论文下载】作者:李华, 汪根树, 张剑, 姜楠, 贾昌昌, 杨扬, 陈规划【摘要】 【目的】 制备出一种人硫氧还蛋白(hTrx)基因修饰的肝细胞。 【方法】 逆转录聚合酶链反应法扩增出hTrx cDNA,应用重组逆转录病毒制备hTrx基因修饰大鼠肝细胞。白蛋白免疫组化SABC法进行肝细胞活性鉴定,MTT比色试验进行抗氧化应激能力检测。【结果】 克隆出hTrx开放阅读框cDNA并制备出重组逆转录病毒,感染真核细胞后可分泌融合表达的hTrx并具有生物学活性。制备出hTrx基因修饰大鼠肝细胞,免疫组化SABC法显示肝细胞功能正常,MTT比色法检测具有较强的抗氧化应激能力(P < 0.05),并可有效增殖。【结论】 成功制备出一种具有较强抗氧化应激的hTrx基因修饰肝细胞。 【关键词】 肝细胞; 人硫氧还蛋白; 基因修饰 Abstract: 【Objective】 To prepare the human thioredoxin (hTrx) gene-modified hepatocytes. 【Methods】 hTrx cDNA was amplified by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR), recombinant retrovirus was applied to primary cultured rat hepatocyte for infection to generate hTrx gene-modified rat hepatocytes, whose viability and antioxidative capacity were examined with albumin-immunohistochemical staining and MTT assay, respectively. 【Results】 The hTrx open reading frames cDNA was cloned and asse
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