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IL-11保护中子照射后肠上皮损伤的Jak/STAT信号转导机制研究
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【中药学大专毕业论文】肠上皮对细胞毒性事件尤其是中子辐射高度敏感,目前尚无防治良策。白细胞介素11( interleukin-11, IL-11)是一种多效能的细胞因子,有研究显示其在一些肠道损伤模型中可保护肠隐窝干细胞[1, 2]。本课题组前期研究结果表明, IL-11可刺激肠上皮细胞表面IL-11受体表达上调,抑制中子辐射后肠上皮细胞凋亡,促进增殖[3]。但有关IL-11诱导的Jak/STAT通路在其中的改变及意义如何,迄今未见报道。肠道放射损伤时,细胞凋亡是其损伤的主要反应之一, Bcl-2和Bax是细胞凋亡的重要调控分子,同时也受到信号转导子和转录激活子3(signal trans-ducer and activator of transcription-3, STAT3)的调控[1, 4]。为此,本研究复制了IL-11保护中子照射肠上皮损伤的体内外模型,并探讨了Jak/STAT通路及Bcl-2、Bax在其中的变化及意义,以期为其防治提供依据和线索。
1 材料和方法
1.1 材料 大鼠空肠上皮细胞系( intestinal epithelium celllineNo. 6, IEC-6)由本所罗庆良研究员惠赠。IL-11粉剂购于杭州九源基因公司。兔抗磷酸化Jak1为Cell Signaling Tech-nology公司产品。HRP标记的山羊抗兔IgG、兔抗β-actin、兔抗Bax及兔抗Bcl-2为Santa Cruz公司产品。BCA蛋白浓度测定试剂盒和Western发光底物试剂盒为Pierce公司产品。预染蛋白标志物为New England Biolab产品。凝胶迁移分析(ElectrophoreticMobility ShiftAssay, EMSA)试剂盒为Promega公司产品, STAT3特异结合序列由上海生工合成, [γ-32P]ATP购自北京福瑞生物公司。SP免疫组化试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司。
1.2 方法
1. 2. 1 细胞培养及IL-11处理 细胞分为正常对照组(
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