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PEG5000修饰后假丝酵母尿酸酶的基本特性
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【中药毕业论文范文】作者:孙晓军 金磊 甘志勇 刘冬【摘要】 目的 研究天然尿酸酶与PEG化尿酸酶的基本特性,为治疗高尿酸血症相关疾病药物做基础研究。方法 用相对分子量5 kD,活化基团为羟基琥珀亚氨的PEG作为专一性修饰剂对尿酸酶进行修饰,采用常规酶学分析方法,分别研究天然尿酸酶与PEG化尿酸酶的动力学参数,并比较修饰前后对抑制剂黄嘌呤的敏感性、最适温度、最适pH值、37℃时的稳定性以及在体半衰期等方面的差异。结果 经PEG修饰后尿酸酶最适温度由30℃升为35℃,最适pH无改变仍为pH8.7;在37℃水浴下,24 h后活性保留由40%增至70%,酶稳定性提高,体内半衰期由45 min延长至11 h;测定尿酸酶和PEG化尿酸酶的Km分别为32.40、36.34 μmol/L,黄嘌呤对尿酸酶与PEG化尿酸酶抑制常数分别为4.72、11.30 μmol/L。结论 假丝酵母尿酸酶经PEG 5 kD修饰后有药用潜力。 【关键词】 高尿酸血症;尿酸酶;PEG修饰;稳定性 【Abstract】 Objective To research the basic characteristics of natural uricase and PEGuricase, prepare PEGuricase, modify the Candida uricase with PEG5000 to improve the stability of the Candida uricase and extend the halflife of uricase in vivo.Methods PEG(relative molecular weight 5 kD, activation group for the NHS Asian ammonia) was used as a pecial modifier to modify uricase. With the conventional enzymatic analysis
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