| | | GluR1在大鼠海马结构的表达
| | 医学实践论文 作者：蒋马莉，韩太真, 杨东伟
【关键词】 海马
Expression of GluR1 in the hippocampus of rats
【Abstract】 AIM: To investigate the expression of AMPA receptor subunit GluR1 in the hippocampus of rats. METHODS: The expression and distribution of GluR1 in hippocampus of rats were examined by using SP immunohistochemical staining method. RESULTS: There was a widespread expression of GluR1 in the hippocampus of adult rats, especially in stratum pyramidal cell, stratum orient and stratum lucidum of CA3 region, and interneuron of dentate gyrus. Positive expression was mainly located in the cytomembrane and processes of the neurons in the CA1 area, and also in the cytoplasm in the CA3 area. CONCLUSION: The expression of GluR1 in the hippocampal CA1 and CA3 area is different. This difference may be attributed to the different functions in different hippocampal subregions.
【Keywords】 receptors, AMPA; GluR1; hippocampus; immunohistochemistry
【摘要】 目的医学实践论文： 观察AMPA受体亚单位GluR1在大鼠海马的医学实践论文表达. 方法： 在多聚甲醛固定的海马切片上，用免疫组化SP法观察GluR1在正常成年大鼠海马结构的表达与分布. 结果： GluR1在正常大鼠海马有广泛表达，在CA3区的起层、锥体细胞层和透明层及齿状回门区内的中间神经元表达最强. 阳性表达在CA1区主要见于神经元的胞膜和突起，而在CA3区还可见于胞质. 结论： GluR1在海马CA1区和CA3区的表达不同，这种差异可能与海马不同区域具有不同功能有关.
【关键词】 受体, AMPA； GluR1；海马；免疫组织化学
0引言
αamino3hydroxyl5methyl4isoxazole propionic acid (AMPA)受体在中枢神经系统介导大多数快速兴奋性突触传递，在长时程增强（LTP）、长时程抑制（LTD）和学习记忆等方面均具有重要作用［1］. GluR1是海马神经元AMPA受体的重要组成部分, 它对于突触可塑性及空间记忆的保留是必需的［2］. 但是GluR1究竟在海马不同区域的分布特征如何，仍不清楚. 我们观察了GluR1在海马的分布，以探讨其分布与功能之间的联系.
1材料和方法
1.1材料SD雌性大鼠6只，体质量220~260 g（由西安交通大学医学院实验动物中心提供），用颗粒型大鼠饲料喂养，自由饮水，动物房温度维持于(21±1)℃，光暗周期为12 h∶12 h,交替时间为7∶00 am. AMPA受体亚单位GluR1抗体购自Sigma公司，SP组化试剂盒和DAB显色试剂盒购自北京中山生物公司.
1.2方法动物用20 g・L-1戊巴比妥钠按45 mg・kg-1腹腔注射麻醉后打开胸腔，经心脏快速灌注生理盐水100 mL, 再用40 g・L-1多聚甲醛 (PB配制, PH 7.4) 300 mL 灌注固定. 取全脑，修块，浸入40 g・L-1多聚甲醛中后固定，4℃过夜. 用振荡切片机作冠状连续切片，片厚40 μm. 切片隔3张取1张，共4片，做漂浮染色. 反应步骤为：① 0.1 mol・L-1 PBS漂洗, 3×5 min； ② 3 mL・L-1 H2O2处理30 min，封闭内源性过氧化物酶,然后用0.1 mol・L-1 PBS漂洗, 3×5 min；③ 10 g・L-1 Triton室温孵育1 h; 0.1 mol・L-1 PBS漂洗, 3×5 min；④ 正常羊血清封闭，室温1 h；⑤ 兔抗GluR1抗体，4℃，72 h； 0.1 mol・L-1 PBS漂洗, 5×5 min；⑥ 生物素化羊抗兔抗体室温1 h；0.1 mol・L-1 PBS漂洗, 5×5 min；⑦ SP复合物室温1 h; 0.1 mol・L-1 PBS漂洗, 5×5 min；⑧ DAB显色；⑨ 裱片，常规脱水, 透明, 中性树胶封片. 阴性对照用正常羊血清替代一抗孵育，其他步骤相同. 实验动物采用同一流程，外部条件保持基本一致. 结果判断以细胞结构呈明确的棕黄色为阳性染色. 所有阴性对照切片不着色,或仅呈淡的背景色. 2结果
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