| | | 黄芪蛰虫合剂体外抗乙型肝炎病毒的作用观察
| | 医学论文 作者： 党双锁，陈云茹，程延安，张正国，王宝峰，张欣，宋平
【关键词】 黄芪蛰虫合剂；HepG2.2.15细胞；肝炎病毒,乙型
【Abstract】 AIM: To evaluate the inhibitive effects of Astragalus and Thoroughfare decoction against hepatitis B virus（HBV） in vitro. METHODS: HepG2.2.15 cells, as target cells, were exposed to different concentrations of Interferon α (IFNα) or Astragalus and Thoroughfare decoction respectively. Realtime PCR was applied to quantify extracellular HBV DNA and enzymelinked immunosorbent assay (ELISA) was used to assess HBsAg and HBeAg. RESULTS: The 50% inhibitory concentration (IC50) of Astragalus and Thoroughfare decoction against HBsAg, HBeAg, and extracellular HBV DNA was 1.35, 1.92 and 2.19 g/L respectively, and treatment index (TI)>3.56-5.79. αIFN had weak inhibitory effects against HBV. CONCLUSION: Astragalus and Thoroughfare decoction can inhibit HBV replication in vitro to some extent.
【Keywords】 Astragalus and Thoroughfare decoction; HepG2.2.15 cell; Hepatitis B Virus
【摘要】 目的医学论文： 观察黄芪蛰虫合剂体外抗乙型肝炎病毒 (HBV) 的医学论文作用. 方法： 以HepG2.2.15细胞为靶细胞，分别加入不同浓度的黄芪蛰虫合剂和α干扰素. 采用ELISA法及荧光定量PCR法，测定药物对细胞培养上清HBsAg, HBeAg及细胞外HBV DNA的抑制作用. 结果： 黄芪蛰虫合剂具有一定程度的抗HBV的作用，其抑制HBsAg, HBeAg及细胞外HBV DNA的50 %抑制浓度(IC50)分别为1.35, 1.92, 2.19 g/L. 治疗指数（TI）>3.56~5.79. αIFN也有抑制HBV的作用，但抑制作用较弱. 结论： 黄芪蛰虫合剂具有一定的体外抗HBV作用.
【关键词】 黄芪蛰虫合剂；HepG2.2.15细胞；肝炎病毒，乙型
我国为乙型肝感染的高发区［1］. 目前，尚没有理想的治疗慢性乙型肝炎的药物. 我国有数千年应用中草药治疗疾病的传统和经验，从中已发现了不少抗乙型肝炎病毒（HBV）的有效单方和复方制剂. 黄芪蛰虫合剂是基于理论研究和临床观察，将黄芪、蛰虫、党参、白术、炙甘草及枸杞这六味中药按君、臣、佐、使进行配伍而自制的复方合剂. 在临床初步试用中发现其具有恢复肝功能、提高机体免疫力、抗肝纤维化和抑制病毒复制的作用. 动物实验表明，黄芪蛰虫合剂对肝纤维化有良好的抑制作用［2］. 我们采用含HBV基因转染的2.2.15细胞株为靶细胞，观察不同浓度黄芪蛰虫合剂体外对HBV的抑制作用.
1材料和方法
1.1材料黄芪蛰虫合剂为自行煎煮，水浴蒸发浓缩至生药浓度为1000 g/L. 尼龙网过滤后经2000 r/min离心，过滤除菌后备用. 实验时用培养液稀释，分别配制成10, 5, 2.5, 1.25, 0.625 g/L共5个浓度梯度. αIFN由深圳市海王生物工程有限公司提供，实验时分别用培养液稀释成5×105, 2.5×105, 1.25×105 IU/L. 噻唑蓝（MTT, Sigma公司）；二甲基亚砜（DMSO, Sigma公司）；HBsAg和HBeAg的ELESA检测试剂盒（上海华泰生物工程公司），DG5031型酶联免疫检测仪（国营华东电子管厂）；HBV DNA提取及扩增荧光检测试剂盒（广州中山大学达安基因股份有限公司），PE7700型自动荧光PCR检测仪（美国Perkin Elmer公司）；HepG2.2.15细胞由第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心张岩博士惠赠；DMEM、胰蛋白酶、L谷氨酰胺(Gibco公司)； 胎牛血清（杭州四季青生物工程材料有限公司）；G418 (Sigma公司)；青、链霉素（华北制药厂）.
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