| | | 中药对镍暴露氧化损伤抑制作用
| | 论文下载 作者：吕晓云，蒲晓丽，陈静，朱玉真，赵健雄，魏虎来
【摘要】 目的论文下载 研究灌服中药扶正解毒汤(FJD)后兔血清对硫酸镍(NiSO4)暴露的论文下载人支气管上皮细胞(16HBE)自由基含量及8羟基2脱氧鸟苷三磷酸酶(8oxodGTPase)表达的影响。方法 体外培养的16HBE细胞分别经NiSO4暴露及NiSO4加扶正解毒汤含药血清共同处理后，采用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)及实时荧光定量RTPCR检测自由基含量及8oxodGTPase表达的变化。结果 NiSO4(800μmol/L)暴露的16HBE细胞，其自由基含量及8oxodGTPase表达水平均高于NiSO4与扶正解毒汤(10%)共处理组细胞，Ｐ＜005～001，相对标准偏差(RSD)＞2%。结论 8oxodGTPase可作为镍暴露氧化应激的标记物；中药扶正解毒汤通过清除自由基，下调8oxodGTPase的表达，对镍暴露氧化损伤具有显著的抑制作用。
【关键词】 扶正解毒汤
本课题组多年进行的体内实验及职业病临床研究表明，中药扶正解毒汤(FJD)具有良好地拮抗镍毒性的作用〔1，2〕。本文从体外途径研究了中药解毒汤对硫酸镍(NiSO4)暴露的人支气管上皮(16HBE)细胞内自由基含量及8羟基2脱氧鸟苷三磷酸酶(8oxodGTPase)表达的影响，旨在为该复方的作用机制补充新的资料。
1 材料与方法
11 材料
111 细胞及动物16HBE细胞(美国ATCC公司)。纯种青紫兰兔8只，雄性，体重(21±03)kg(中国兰州生物制品研究所)，合格证号：14004，常规饲养。
112 中药 扶正解毒汤由红芪、当归、丹参、枸杞等组成，以三蒸水煎煮，过滤、浓缩成含生药4g/ml的溶液，高温高压消毒灭菌，密封，4℃以下储存备用。
113 主要试剂及设备 基础培养液(MEM)培养基、Trizol试剂盒(美国GIBCO公司)；小牛血清(杭州四季青生物工程材料公司)；乙酰乙酸盐2，7二氯氢化荧光素(D399)(美国Molecular Probes公司)；ExScripＴＭRT reagent Kit及SYBR Premix Ex TaqTM试剂盒(日本TaKaRa公司)；TCS sp2型激光扫描共聚焦显微镜系统(德国Leica公司)；Smart Cycler ⅡSystem荧光定量PCR仪(美国PE公司)。人类human NutT homologue (hMTH1)基因PCR引物设计参照文献〔３〕。分别为P1：5′CTTCTCTGCGCCACTCAA3′，P2：5′GAGCGGCGGTGCAGAACC3′；预计扩增片段177bp。βactin引物为P1：5′TTGCGCTCAGGAGCAAT3′，P2：5′TTCCAGCCTTCCTTCCTGG3′；预计扩增片段223bp(宝生物工程有限公司合成)。
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