| | | 氡暴露对大鼠气管-支气管上皮细胞转化影响
| | 毕业论文在人类生活环境的毕业论文天然本底辐射中,由于吸入氡及其子体所产生的毕业论文辐射剂量约占54%,氡暴露导致的健康危害,已成为近年来的研究热点。大鼠气管-支气管上皮细胞是研究氡暴露生物效应的良好模型,但由于受到染毒装置等条件的限制,过去多进行体外研究。本实验利用多功能移动式氡室对大鼠动态吸入染毒,利用建立的动物模型,采用消化后刷洗法分离得到大鼠气管-支气管上皮细胞[1],观察氡染毒后靶细胞体外发生转化的过程,探讨氡暴露对细胞的损伤效应。 1 材料与方法 11 实验动物处理 实验用Wistar雄性大鼠,7~8周龄(上海斯莱克实验动物有限责任公司)许可证号:SCXK(沪)2003-0003。采用自制HD-3型多功能移动式氡室,对大鼠动态吸入染毒。按照氡染毒的累计暴露量,分为60,90,120工作月(Working Level Month,WLM)和对照组共4组,每组6只动物。染毒时间每天8h,每周6d,染毒期间动物自由活动饮食。 12 选择性培养基制备 选择性F12培养基为Ham’s F12培养基,含有2%胎牛血清,5mg/L胰岛素,03μ mol/L氢化可的松。 13 气管-支气管上皮细胞的分离和培养 实验组及对照组大鼠气管-支气管上皮细胞的分离和培养采用本实验室建立的消化后刷洗法,见文献[1]。 14 细胞集落形成率 收集大鼠气管-支气管上皮细胞,制成细胞悬液,以1×105个/60mm培养皿接种于无血清完全F12培养基中37℃5%CO2培养箱中培养,7~8d后计数其形成的细胞集落数,并根据接种的细胞量计算细胞集落形成率(CFE)。一个细胞集落的标准是含有15个细胞以上的细胞团,CFE=细胞集落数/接种的细胞量×100%。
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