首页 教育论文中心 论文分类 论文搜索 论文发表 汇款确认 会员专区 在线购卡 服务帮助 联系我们 网站地图
当前位置：教育论文中心首页--西医学医学实践论文--应用PVA构建妊娠相关血浆蛋白A固相时间分辨荧光免疫试剂
推荐论文
·如何撰写调查报告
·暑假社会实践报告--走进
·暑假社会实践报告--走进
·暑期社会实践--企业管理
·大学生寒假实习报告范文-
·民工子女生活现状的大学生
·浙江大学生暑期社会实践报

·师范大学大学生暑期教学社
·大学生暑期农村教育实践报
·大学生暑期“三下乡”社会
科目列表
市场营销 管理理论 人力资源
电子商务 社会实践 先进教育
伦理道德 艺术理论 环境保护
农村研究 交通相关 烟草论文
电子电气 财务分析 融资决策
电影艺术 国学论文 材料工程
语文论文 数学论文 英语论文
政治论文 物理论文 化学论文
生物论文 美术论文 历史论文
地理论文 信息技术 班主任
音乐论文 体育论文 劳技论文
自然论文 德育管理 农村教育
素质教育 三个代表 旅游管理
国际贸易 哲学论文 工商管理
证券金融 社会学 审计论文
会计论文 建筑论文 电力论文
水利论文 园林景观 农林学
中医学 西医学 心理学
公安论文 法学法律 思想汇报
法律文书 总结报告 演讲稿
物业管理 经济学 论文指导
计算机 护理论文 社会调查
军事论文 化工论文 财政税收
保险论文 物流论文 语言教育
教育教学 给水排水 暖通论文
结构论文 综合类别  

 
应用PVA构建妊娠相关血浆蛋白A固相时间分辨荧光免疫试剂

［摘要］ 目的医学实践论文：合成(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+复合物，并用于构建妊娠相关血浆蛋白A固相时间分辨免疫荧光试剂。方法：用PVA作为载体结合BCPDAEu3+和生物素亲和素，以双抗体夹心法原理，结合生物素标记抗体和包被抗体建立PAPPA时间分辨免疫荧光试剂，并进行方法学评价。结果：成功的医学实践论文合成了活性的(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+复合物，构建PAPPA试剂检测灵敏度为0.7 mIU/L；批内变异系数在3.89%～4.96%之间,批间变异系数在7.35%～9.27%之间。结论：合成的(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+复合物较高的反应活性，可以用于多种试剂的构建。构建的PAPPA试剂灵敏度高，具有潜在的临床应用价值。
　　［关键词］ 妊娠相关血浆蛋白A；固相时间分辨荧光免疫；亲和素—生物素—聚乙烯胺—4,7二氯磺苯基1，10啡罗啉2，9二羧酸—铕复合物；唐氏综合征
　　Develop A Direct Solid Phase Lanthane Timeresolved Fluoroimmunoassay Reagent of PAPPAutilizing PVA
　　Abstract :Objective To develop a direct solid phase lanthane timeresolved fluoroimmunoassayreagent of PAPPA by synthesizing a complex of (SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+. Methods  Polyvinylamine (PVA) was labeled with biotinstreptavidin and europium chelate of 4,7bis(chlorosulfophenyl)1,10phenanthroline2,9dicarboxylicacid(BCPDA). Using labeled PVA complex,We designed twosite sandwich timeresolved fluoroimmunoassay of PAPPA and evaluated assay characteristics of PAPPA kit .Results We successed synthesizing a conjuagete of (SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+ and a reagent of PAPPA. Detection limits achieved were 0.7mIU/L.The calibration curve was linear 010000mIU/L.Intra and interassay imprecision (CV) was 3.89%4.96% and 7.35%9.27%.Recovery was 95.8%104.2%. Conclusions The conjugate of (SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+ synthesizied was reactive ,highly fouorescent. A sorts of kit could be synthesized ,taking advantage of it. The reagent of PAPPA was potentially suited for use in clinical with highly analytical sensitivity.
　　Key words: Pregnancy associated plasma protein A;Direct solid phase lanthane timeresolved fluoroimmunoassay; StreptavidinbiotinPolyvinylamine europium chelate of 4,7bis(chlorosulfophenyl)1,10phenanthroline2,9dicarboxylicacid; Downs Syndrome
　　妊娠相关血浆蛋白A(Pregnancy associated plasma protein A，PAPPA)是一种高分子α2糖蛋白，20世纪70年代在孕妇血清中被发现［1］。在孕妇血中主要PAPPA是胎盘滋养层组织分泌，它是一种异源四聚体，由两个分子量为200 000~250 000亚基构成。PAPPA亚基和两个嗜红细胞主要基础蛋白(Proform of eosinophil major basic protein)以二硫键结合而成［2］，在孕妇血中只存在微量游离单体PAPPA。PAPPA亚基由1 547个多聚核苷酸构成，包括1个拉长的锌指结构，3个Lin—notch重复序列，以及5个短一致重复序列［3］。在体内PAPPA是一种蛋白酶，主要针对胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP4)和胰岛素样生长因子结合蛋白5(IGFBP5)起作用。胰岛素样生长因子I(IGFI)在促进细胞分裂和增殖起重要作用，它主要通过IGF1受体起作用，IGFI、II的生物活性受6个高亲和性IDFBP调节［4，5］。PAPPA主要用于产前筛查唐氏综合征(Downs Syndrome，DS)，迄今医学上对此病尚无有效的治疗和预防措施，只能通过产前筛查防止DS儿的出生，但目前开展的绒毛活检,羊水穿刺及脐带血穿刺均为侵入性检查,有1%～3%的流产率,且方法繁琐,出报告时间长,不适宜大范围孕妇的普查,仅限于高危人群的诊断。大量报道认为PAPPA可作为DS胎儿产前筛查的的标志物。在15周～20周通过结合孕妇孕周、超声诊断和FreeβHCG可以鉴别65%～75%，但要在3个月～6个月结合AFP、游离E3以及抑制素上述成分可鉴别85%～90%［6］。有文献［7］报道PAPPA在急性冠状动脉综合征(ACS)的早期诊断有一定的意义，PAPPA在ACS患者血清含量＜30 mIU/L，同时结构不同于孕妇体内的PAPPA且存在动态变化，必须利用超灵敏的方法进行检测。国内PAPPA的诊断试剂大多为ELISA和PerkinElmer公司生产的解离增强时间分辨荧光免疫分析(dissociated enhance lanthane timeresolved fluoroimmunoassay,DELFIA)试剂，无国产PAPPA时间分辨荧光试剂。我们利用PVA(聚乙烯胺)作为载体结合BCPDA镧系螯合物合成一种高灵敏的固相时间分辨荧光免疫分析(direct solid phase lanthane time resolved fluoroimmunoassay,DSLFIA)试剂。为提高检测灵敏度和克服BCPDA标记抗体使抗体失活的问题，我们引入了生物素亲和素(biotinstreptavidin system)系统。
 
<<<<<全文未完>>>>> 全文字数约$$$zishu$$$字
是否要阅读全文?点卡会员将扣除1点!点击阅读全文
 
 
 
版权所有 教育论文中心 Copyright(C) All Rights Reserved
联系方式： QQ:277865656 或写信给我