| | | 组织型纤溶酶原激活因子对生物材料表面血小板黏附的体内和体外实验研究
| | 中医学论文 【摘要】 目的中医学论文 本文观察组织型纤溶酶原激活因子(t-PA)包被Dacron和PTEE材料对表面血小板黏附的中医学论文体内和体外实验。方法 通过体内和体外动物模型实验,观察血小板在材料表面的黏附情况和对机体内血小板黏附的影响。结果 通过t-PA处理后,上述两种材料表面的血小板黏附数目较对照组明显减少(P<0.01),机体内血小板黏附也较空白组明显减少 (P<0.01)。结论 t-PA可通过抑制血小板在材料表面的黏附,进而推断可以用于防治生物材料的细菌黏附。组织型纤溶酶原激活因子(t-PA)具有特异的溶栓作用。 【关键词】 组织型纤溶酶原激活因子(t-PA);包被Dacron;PTEE;表面血小板 近年来的很多研究表明[Lin TL,Lu FM,Sheu MS. Antimicrobial coatings: A remedy for medical device-related infections. Med Dev Tech,2001],在由生物材料引发的感染(biomaterial centered infection,BCI)中,45%的原因是因为生物材料与人体接触时,血液和组织中的纤维粘连蛋白(fibronectin)、玻璃粘连蛋白(vitronectin)和纤维蛋白原(fibrinogen)会吸附在材料表面,形成一层蛋白膜,而细菌很容易在这层蛋白膜上黏附,继而生长繁殖,逐渐形成一层顽固的水合多聚糖性质的生物活性膜(biofilm)[1]。这层生物膜可以吸收营养物质,具有一定厚度,产生很强的抗药能力,传统的抗菌治疗是无法根除的。根据细菌性感染的机理,本文就t-PA对生物材料表面血小板黏附的作用及影响进行初步探讨。 1 实验材料与方法 1.1 材料和仪器 涤纶(Dacron)B型(苏州华明织带有限公司),膨体聚四氟乙烯(PTEE,美国Gore&Associates公司)。谷胱苷肽硫基转移酶(Glutathione-S-trasferase,GST)和GST-t-PA融合蛋白由实验室制备,液体培养基(法国生物梅里埃公司)。 1.2 材料的包被 将Dacron和PTEE薄膜剪裁成96孔酶标板等大的原片,用蒸馏水充分漂洗干净后在70%的酒精中浸泡30min,无菌条件下取出、晾干,置入96孔板中,每种材料分成3组,每孔分别加入100μl含0.5mg/ml GST-t-PA的Tris-HCl缓冲液(pH8.0)或含0.5mg/ml GST的Tris-HCl缓冲液或单纯的Tris-HCl缓冲液,4℃放置过夜,弃去上清液,用Tris-HCl缓冲液(50mM Tris-HCl,pH8.0/120mM NaCl)轻轻漂洗两次移入新的96孔板孔中备用。
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