| | | 四甲基偶氮唑盐比色法测定Vero毒素-1的CD５０
| | 西医学 小论文下载【摘要】 目的西医学 小论文下载 测定Vero毒素-1对Vero细胞的西医学 小论文下载毒性。方法 用四甲基偶氮唑盐比色法测定Vero毒素-1对Vero细胞的毒性。结果 Vero毒素-1的CD５０为1pg。结论 四甲基偶氮唑盐比色法方法简便，灵敏度高，且没有同位素的污染，是测定Vero毒素-1对Vero细胞毒性的一个简便方法。
【关键词】 Vero毒素-1；四甲基偶氮唑盐；CD５０
An MTT colorimetric assay for measurement of the CD５０ to vero cells of Vero toxin-1
【Abstract】 Objective To determine the CD５０ to Vero cells of Vero toxin-1.Methods MTT colorimetric assay was used.Results The purified Vero toxin-1 showed cytotoxicity to Vero cells and killed about 50% of cells to 1pg . Conclusion MTT colorimetric assay is a suitable method for the determination of the CD５０ to Vero cells of Vero toxin-1.
【Key words】 Vero toxin-1；MTT；CD５０
肠出血性大肠杆菌能引起出血性结肠炎，溶血性尿毒综合征，其主要血清型O１５７：H7于1982年首次在美国被发现，从而引起出血性结肠炎的爆发流行。1996年在日本也发生了O１５７：H7大肠杆菌爆发流行，共有九千多名儿童感染，死亡12例［１～３］，我国也有O１５７：H7的感染病例。肠出血性大肠杆菌的致病作用主要通过细菌对肠道上皮细胞的黏附和产生毒素两个过程，Vero毒素是其中的主要毒力因子。根据免疫原性，毒素又可分为Vero毒素-1和Vero毒素-2两种。Vero毒素-1有A，B两种亚基组成，其中B亚基的分子量为7.7KDa，它与宿主肠壁黏膜细胞的糖脂受体GB３结合，介导A亚基进入细胞，干扰蛋白质的合成［４～７］。
为了检测Vero毒素-1的毒性，需建立一种适用于常规检测的方法。以前测定细胞毒性一般采用３Ｈ-TdR掺入法或肉眼目测法，前者由于使用了同位素，因而不适用于常规检测，后者受实验者个人经验等因素的影响，所以重复性较差。
1983年Mcsmann介绍了用四甲基偶氮唑盐比色法测定细胞毒性，由于其操作简便，不使用同位素等优点，现已逐步用于许多研究工作中［８，９］。本实验室应用四甲基偶氮唑盐比色法测定了Vero毒素-1的CD５０，为检测Vero毒素-1的毒性提供了一种新的方法。
1 材料与方法
1.1 细胞及培养 实验所用细胞为vero细胞(非洲绿猴肾细胞)。细胞在MEM培养液(含10%小牛血清2mmol/L谷氨酰胺，100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素)于5%CO2的培养箱中37℃培养。
|
| | |
| | | | <<<<<全文未完>>>>> 全文字数约1472字 | |
| | |
| |
|
教育论文中心