| | | 流动注射化学发光法测定纳克水平克林霉素*
| | 医学论文网【摘要】 目的医学论文网 建立快速测定克林霉素的医学论文网新方法。方法 以克林霉素在一定浓度范围内与luminol-H2O2化学发光强度增加值的线性关系为基础,建立了一种快速、灵敏测定克林霉素的流动注射化学发光新方法。结果 测定的线性范围从1.0pg/ml到1.0ng/ml (r2=0.9996),相对标准偏差少于3.0%(n=5),检出限为0.3pg/ml (3σ)。本法成功地应用于对克林霉素胶囊和人血清和尿液的测定。结论 该法简便快速、灵敏度高、选择性好。 【关键词】 克林霉素;鲁米诺;化学发光;流动注射 【Abstract】 Objective A novel assay for the determination of clindamycin was presented.Methods The action was significant in the chemiluminescence system of luminol-hydrogen peroxide with clindamycin as an enhancer. The enhancement of CL intensity was proportional to the concentration of clindamycin.Results The enhanced chemiluminescence intensity was linear with the concentration of clindamycin over the range from 1.0 pg/ml to 1.0 ng/ml (r2 = 0.9996), the detection limit was 0.3 pg/ml (3σ) with a relative standard deviation of less than 3.0% (n = 5). The proposed method was applied successfully in the assay of clindamycin in capsules, human urine and serum without any pre-treatment procedure.Conclusion The proposed method offers advantages of simplicity, high sensitivity, selectivity and wide linear for the determination of clindamycin. 【Key words】 clindamycin; luminol; flow injection; chemiluminescence 克林霉素为一种抗生素,适用于葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎球菌等引起的皮肤软组织感染、上下呼吸道感染、急慢性骨髓炎等。测定克林霉素方法很多,主要有配置不同检测器的高效液相色谱法(如紫外检测器[1]、质谱检测器[2]、电化学检测器[3])、胶体电动色谱[4]等。采用流动注射化学发光法测定克林霉素尚未见报道。化学发光法具有以下优点:灵敏度高、线性范围宽、快速测定、设备便宜、操作简单。在鲁米诺-过氧化氢体系中,克林霉素能够显著加强该体系的发光强度, 且克林霉素的浓度从1.0pg/ml到1.0ng/ml,相对标准偏差少于3.0%(n=5),检出限为0.3pg/ml (3σ)。当流速为2.0ml/min时,测定克林霉素能在0.5min内完成。该方法被成功地应用于克林霉素胶囊、尿样、血样的测定,且回收率为86.2%~108.8%。 1 实验部分 1.1 试剂 实验中所用试剂均为分析纯。鲁米诺购自Fluka, Biochemika,其贮备液为2.5×10-2mol/L;5×10-5 mol/L过氧化氢溶液;0.05mol/L氢氧化钠溶液;克林霉素购自陕西省药物管理所,其标准液为1.988mg/ml; 实验中所用水均由二次水经Milli-Q (Millipore,Bedford, MA, USA)纯化。 1.2 实验操作 开动蠕动泵待记录仪基线稳定后,按图1所示流动注射分析流路,在流速为2ml/min条件下,将鲁米诺溶液与过氧化氢溶液同载液混合后通过六通阀与克林霉素试液进入混合管,在氢氧化钠存在的条件下在发光池内产生化学发光。发光强度用光电倍增管接收,然后用记录仪记录发光强度值。
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