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慢性肾小球肾炎患者血清β1和M2受体自身抗体的变化

                    作者:赵林双,廖玉华,王敏,向光大,候洁,乐岭,兰天飚,王旭,王平
【关键词】  肾小球
    Changes of autoantibodies against β1 adrenergic receptor and M2 cholinergic receptor in chronic glomerulonephritis with renal failur
    【Abstract】 AIM: To explore the role of autoantibodies against M2 muscarinic cholinergic receptor(M2 receptor) and β1 adrenergic receptor(β1 receptor)in the development of chronic glomerulonephritis (CGN) with renal failure. METHODS:  The epitopes of the second extracellular loop of M2  receptor (169-191) and β1 receptor (197-222) were synthesized and used respectively to screen serum autoantibodies from patients with CGN with renal failure (n=66), hypertension patients without renal failure (n=58) and healthy blood donors (n=40, control) by ELISA. RESULTS:  In CGN patients with renal failure, the positive rates of the autoantibodies against β1 receptor and M2 receptor were 62.1% and 48.5% respectively, which were both higher than those in the hypertension patients without renal failure (19.0% and 20.7% respectively) and the healthy donors (17.5% and 15.0% respectively) (P<0.01). CONCLUSION:  These autoantibodies against β1 receptor and M2 receptor may play some important roles in the pathogenesis of CGN with renal failure.
    【Keywords】 chronic glomerulonephritis;  receptors;   autoantibodies
    【摘要】 目的西医学 毕业小论文:探讨M2受体和β1受体自身抗体与慢性肾小球肾炎(CGN)发病的西医学 毕业小论文关系. 方法:以合成的M2受体和β1 受体多肽片段为抗原,用ELISA技术检测66例CGN患者、 58例高血压无肾损害患者及40例正常人血清中M2和β1受体自身抗体. 结果:CGN组β1和M2受体抗体阳性率分别为62.1%和48.5%,明显高于高血压无肾损害组(19.0%和20.7%)及正常对照组(17.5%和15.0%)(P<0.01). 结论:血清中M2和β1受体自身抗体可能与CGN发病有关.
    【关键词】 慢性肾小球肾炎; 受体; 自身抗体
    0引言
    近来研究发现在难治性高血压患者血清中,检出抗AT1和α1受体自身抗体,这些患者合并肾损害频率明显增高[1] . 我们拟检测慢性肾小球肾炎(chronic glomerulo nephritis, CGN)及高血压无肾损害以及正常人血清中抗M2胆碱能受体(M2受体)和β1肾上腺素受体(β1受体)自身抗体,探讨其与CGN肾损害的关系.
    1对象和方法
    1.1对象200101/200211确诊CGN 66(男30,女36)例,年龄(40.4±5.2)岁,均按照慢性原发性肾小球肾炎诊断标准[2]确诊. 排除继发性肾小球疾病,原发性高血压及肾囊肿、泌尿系结石. 高血压无肾损害患者58(男41,女17)例,年龄(59.4±10.5)岁,诊断参照1999 WHO/ISH高血压防治指南[3]. 健康对照组40(男22,女18)例,平均年龄(44.9±7.4)岁,来自健康体检者,胸部正侧位片、心电图、生化检查正常;肝肾功能、血清电解质、心肌酶及血常规、尿常规等检查正常. 以上3组均排除内分泌及自身免疫性疾病. 所有病例记录患者的临床情况及试验室检查资料. 采集受检查者清晨空腹静脉血5 mL,离心取血浆后-40℃贮存备用.
    1.2方法采用多肽自动合成仪(Shimadzu PSSM8)用固相多肽合成法合成β1和M2受体. β1受体和M2受体多肽片段序列参考文献[4-5]:分别合成了相当于人β1与M2受体细胞外第二环氨基酸序列的肽段(β1肽段为197~222位的氨基酸序列:HWWRAESDEARRCYNDPKCCFVTNRC;M2肽段为169~193位的氨基酸序列:VRTVEDGECYIQFFSNAAVFGTAIC). 高压液相色谱分析合成肽的纯度在95%以上. 按照本实验室建立的方法[6],检测抗β1受体和M2受体自身抗体. 实验中设置空白对照和阳性、阴性对照,测A值时以空白对照调零,以保证检测结果的可靠性. 以健康人群为参考血清,取A值超出对照健康人群两倍标准差的患者血清标本为阳性对照血清. 研究血清与阴性血清的吸光度之比([标本A值-空白对照A值]/[阴性对照A值-空白对照A值])超过2.1倍者判为抗体检测阳性. 血清抗β1和M2受体自身抗体的检出频率: 取已知1∶100, 1∶200, 1∶400, 1∶800稀释度抗β1和M2受体自身抗体阳性、阴性血清作为参考血清. 患者血清在稀释度1∶200和1∶400阳性率较为稳定,我们选择与1∶200作为常规稀释度. 于取血前1 d清晨07:00开始收集24 h尿,加甲苯酸防腐,混匀后记录总量,用酶联免疫吸附法(ELISA),上海波佳生物技术有限公司提供药盒测定尿微量蛋白.统计学处理:用SPSS 10.0软件进行,数据用x±s表示,计数资料用χ2检验,多组均数间的比较用单因素方差分析,方差不齐组间的比较用非参数检验.    2结果
 
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