| | | 人眼小梁组织及体外培养的人眼小梁细胞SPARC mRNA及其蛋白表达
| | 药学类毕业论文【关键词】 人眼
Expression of SPARC mRNA and SPARC protein in human trabecular meshwork and cultured human trabecular meshwork cells in vitro
【Abstract】 AIM: To investigate whether secreted protein acidic rich in cysteine（SPARC) and SPARC mRNA are expressed in human trabecular meshwork（TM） and cultured human trabecular meshwork cells（TMCs） and to explore the roles of SPARC protein in the pathogenesis of primary openangle glaucoma (POAG). METHODS: RTPCR and WesternBlot were used to detect SPARC mRNA and SPARC protein and immunofluorescence staining of cultured TMCs was performed by antiSPARC antibody. RESULTS: RTPCR of TM and TMCs using SPARC specific primers of the RNA displayed the presence of the predicted band of approximately 300 bp. WesternBlot showed a protein band of 43 Ku. CONCLUSION: Human TM and TMCs can express SPARC mRNA and its correlative protein, which influences the accumulation and degradation of extracellular matrix.
【Keywords】 trabecular meshwork；trabecular meshwork cells； secreted protein acidic rich in cysteine；extracellular matrix；primary openangle glaucoma
【摘要】 目的药学类毕业论文：研究人眼小梁组织（TM）及体外培养的药学类毕业论文人眼小梁细胞（TMCs）是否可以表达酸性富含胱氨酸分泌型蛋白（SPARC) mRNA及SPARC蛋白. 探讨SPARC蛋白在原发性开角型青光眼（POAG）发病机制中的作用. 方法：分别采用RTPCR和WesternBlot方法，对小梁组织和细胞进行检测，用抗SPARC蛋白免疫荧光染色方法对细胞进行染色. 结果：组织和细胞RTPCR均在300 bp处出现预期的电泳条带，组织和细胞WesternBlot在Mr为43×103处出现蛋白条带. TMCs抗SPARC免疫荧光染色表现为胞质均匀着色. 结论：TM组织及体外培养的人眼TMCs均可表达SPARC mRNA及其相关蛋白，并起着调节细胞外基质（ECM）的生成和降解作用.
【关键词】 小梁组织；小梁细胞；酸性富含胱氨酸分泌型蛋白； 细胞外基质；原发性开角型青光眼
0引言
小梁网（trabecular meshwork, TM）临管区的邻管组织（juxta canalicular tissue, JCT）是形成房水流出阻力的重要部位，它是由小梁细胞（trabecular meshwork cells, TMCs）和细胞外基质（extracellular matrix, ECM）组成的无定型组织层. ECM在细胞外的表达处于持续的重塑状态. 其合成和降解是调节房水流出阻力的一个重要环节［1］. 研究表明酸性富含胱氨酸分泌型蛋白（secreted protein acidic rich in cysteine，SPARC）在调节ECM的合成和降解中起着重要的作用. 它是一种细胞外基质相关糖蛋白的调节蛋白，又称为骨连蛋白，由3个结构域组成，Mr为43×103. 在多种组织中都发现了SPARC基因和其相关蛋白的表达，并起着调节细胞黏附、增殖、ECM的合成/转化以及ECM与细胞连接的作用［2］. 我们研究人眼TM组织和体外培养的人眼TMCs是否表达SPARC mRNA及其相应的SPARC蛋白，以进一步探讨改善房水流出、调节眼压（intraocular pressure, IOP）的机制以及原发性开角型青光眼（primary openangle glaucoma, POAG）的发病机制.
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