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hHGF基因肾脏电转染对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用

                                                             作者:李宓 杜艺 陈家湄 彭莉 邹和群
【摘要】    目的临床医学检验论文: 使用肾脏直接基因电转染方法对大鼠肾脏进行hHGF基因转染,观察该基因转染对肾脏缺血再灌注损伤的临床医学检验论文保护作用. 方法: 雄性SD大鼠20只,随机分为转染组和对照组,每组10只. 在热缺血前3 d将含有hHGF基因的质粒用电转染方法转入大鼠肾脏,3 d后建立大鼠肾热缺血模型,观察hHGF的药代动力学,并对缺血肾脏进行功能和组织学评价. 结果: hHGF基因电转染组肾组织及血浆hHGF基因表达水平高于对照组(P<0.01). 转染组血肌酐水平低于对照组(P<0.01),肾功能恢复快于对照组. 组织学评价显示,转染组肾小管细胞凋亡评分低于对照组(P<0.05). 转染组淋巴细胞、巨噬细胞及中性粒细胞浸润均较对照组少. 结论: 肾脏hHGF基因电转染组hHGF药代动力学和治疗效果均显示,该基因电转染对肾脏缺血再灌注损伤有保护作用.
【关键词】  肾脏 缺血再灌注损伤 人肝细胞生长因子 基因治疗
      0引言
    缺血再灌注损伤引起的急性肾衰与移植肾的慢性进行性损伤及远期移植肾失功有着密切的关系[1]. HGF是一种多肽的细胞因子,是肾脏的调理素,可促进组织重建,减轻组织纤维化和功能障碍[2]. 但该细胞因子注入体内后其活性极不稳定,不能发挥其器官保护功能,因此我们将通过肾脏直接电转染hHGF基因的方式,观察该基因对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用,从而为移植肾的缺血再灌注损伤寻找一种体外器官治疗的方法.
    1材料和方法
    1.1材料健康雄性SD大鼠20只,体质量250~300 g,购于北京大学试验动物中心. DNA结合SP1017(加拿大 Laval ), 鼠抗鼠mAb(Oxford UK),ELISA  hHGF检测试剂盒(Quantikin ), CD45RC(Oxford UK), 马抗羊IgG(美国Vector Laboratories),DAB显色剂(SigmaAldrich ),PARP凋亡过氧化酶试剂盒(西班牙Labclinics Barcelona ),分光光度计(Beckman), BTXECM830电转染机(Harvard Apparatus ).
 
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