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Id1启动子的荧光素酶报告基因载体的构建及其在肝癌HepG2细胞中的活性检测
                                  作者：丁睿，韩霜，雷婷，刘杰，窦科峰
   【摘要】  目的：扩增Id1启动子基因，构建Id1启动子的报告基因载体. 方法：通过PCR及双酶切方法，从HepG2细胞基因组DNA中获得Id1基因编码序列上游包含不同长度碱基的两段Id1启动子序列；分别克隆到报告基因pGL3enhancer载体上，构建包含两段不同长度Id1启动子的报告基因载体；用脂质体转染法将两报告基因载体分别转染至肝癌HepG2细胞系；采用双荧光素酶报告基因系统评估Id1启动子活性. 结果：经PCR方法扩增出大小分别为1096 bp和266 bp的两段不同长度的Id1启动子片段，序列测定其编码序列及读框正确，酶切鉴定亚克隆序列正确. 瞬时转染HepG2后经报告基因检测，两段启动子均具有转录活性. 结论：成功构建了Id1启动子的报告基因载体，为进一步研究Id1启动子和肝癌的关系奠定了实验基础.
 
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