| PBK/TOPK在TPA诱导的人HL
| | 西医学 教育论文下载【关键词】 HL
Expression and significance of PBK/TOPK in differentiation of human HL60 leukemic cells induced by TPA
【Abstract】 AIM: To investigate the expression and significance of PBK/TOPK in the differentiation of human HL60 leukemic cells induced by TPA. METHODS: After induction of TPA, WrightGiemsa staining was performed to observe the morphological changes of HL60 cells and flow cytometry was used to observe the cell cycles and the expressions of CD11b, CD14, CD13, CD33, respectively. Expression of PBK/TOPK was detected by Western Blot. RESULTS: After the treatment with 5.1 nmol/L TPA for 3 d, the number of NBT positive cells and the expressions of CD11b, CD13 and CD14 increased, and the expression of PBK/TOPK decreased. CONCLUSION: TPA can inhibit the proliferation of HL60 cells and induce the differentiation of HL60 cells into the granulocytic or monocytic lineage. During the process, PBK/TOPK expression is downregulated and the expression of PhoPBK/TOPK is upregulated.
【Keywords】 HL60 cells; PBK/TOPK; cell differentiation; phorbol exters
【摘要】 目的西医学 教育论文下载： 研究PBK/TOPK在TPA(佛波酯)诱导白血病细胞HL60的西医学 教育论文下载分化时的表达及意义. 方法： 细胞化学染色法观察药物作用后细胞形态的变化;流式细胞仪检测药物对HL60细胞周期及细胞表面分化抗原CD11b, CD14, CD13和CD33表达的影响；用western Blot法检测PBK/TOPK在HL60细胞分化前后表达的变化. 结果： 经5.1 nmol/L TPA处理72 h后,NBT阳性细胞数和CD11b, CD13, CD14表达是增加的，HL60细胞体积缩小,核浆比例减低,核仁减少甚至消失,核形态扭曲折迭或分叶;PBK/TOPK在HL60细胞向成熟分化后表达下调. 结论： TPA能抑制白血病细胞HL60的增殖,并诱导其向成熟单核、粒细胞分化,在此过程中，PBK/TOPK表达是下调的，但PhoPBK/TOPK的表达是增加的.
【关键词】 HL60细胞；PBK/TOPK；细胞分化；佛波醇酯类
0引言
白血病是严重威胁人类特别是青少年生命的恶性肿瘤，深入研究白血病的发病机制为彻底治愈它提供希望. 近来研究表明信号转导通路的异常参与了肿瘤的发生［1］. PBK/TOPK是MAPKK家族新的成员，主要表达于人的睾丸、胎盘、心肌组织、胰腺，并在多种Burkitt淋巴瘤系和1例急性淋巴细胞白血病中表达上调［2］. 我们以急性粒细胞系HL60细胞为研究对象，探讨PBK/TOPK在佛波酯（TPA诱导HL60分化机制中的作用，以期为白血病的基础研究和临床治疗提供一条有效的途径.
1材料和方法
1.1材料人急性髓细胞白血病细胞株HL60由本室保存. PBK/TOPK为美国Cell signal technology公司产品，新生牛血清购自杭州四季青生物工程材料有限公司,硝基蓝四氮唑(NBT)为Promega公司产品,佛波酯(TPA)为美国Sigma试剂公司产品. 小鼠抗人CD11b, CD13, CD33和CD14 FITC荧光标记的mAB购自Immunotech公司.
1.2方法
1.2.1细胞培养细胞培养于含体积分数为100 mL/L灭活小牛血清的RPMI1640培养液，置37℃、饱和湿度、50 mL/L CO2培养箱中悬浮培养. 2~3 d换液1次. 实验所用细胞处于对数生长期.
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