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总黄曲霉毒素ELISA定量检测试剂盒研制
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【摘要】 目的 研究并建立敏感、特异和快速的针对食品中总黄曲霉毒素的ELISA检测方法,形成具有我国自主知识产权的快速定量检测试剂盒。方法 在生产抗总黄曲霉毒素单克隆抗体基础上,利用间接竞争ELISA方法,研制出食品中总黄曲霉毒素快速检测试剂盒,并对试剂盒的各项技术参数进行测定。结果 该试剂盒对黄曲霉毒素B+G标准品的最低检出浓度为026ng/ml,标准曲线的线性范围为026~2000ng/ml,线性方程y=-04463x+03532(R2=09915);对黄曲霉毒素B+G50%的抑制浓度为208ng/ml;试剂盒的条内变异系数为418%,条间变异系数为521%,抗体亲和力常数为152×10-10mol/L;对玉米3个加标水平的平均回收率分别为9863%,9456%和11205%;对花生的3个加标水平的平均回收率分别为8866%,8750%和8560%。试剂盒37℃可放置96h以上;试剂盒对黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的交叉反应率分别为100%,575%,104%和19%,与其他真菌毒素无交叉反应。结论 研制出的ELIS试剂盒能定量检测食品中总黄曲霉毒素。
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