|
|
|
ERCC1蛋白表达及对草酸铂细胞毒作用影响
|
| |
【摘要】 目的 建立表达核苷酸切除修复交叉互补集团1(ERCC1)蛋白细胞系，评价ERCC1表达对草酸铂细胞毒作用的影响。方法 由人肠癌肿瘤组织提取RNA,合成cDNA，扩增ERCC1基因片段，Gateway定向克隆技术转染UV20细胞后，细胞抑制率测定(SRB)评价草酸铂的细胞毒作用。结果 获得转染成功的UV20-ERCC1细胞，Western blot证实ERCC1的表达，细胞抑制率测定(SRB)分析表明，ERCC1表达水平增加与草酸铂敏感性降低密切相关。结论 Gateway可成功构建包含ERCC1基因的表达载体，转染细胞后，提供体外研究ERCC1基因功能平台。草酸铂细胞毒作用与ERCC1基因表达水平具有一定关联。
【关键词】 肿瘤耐药性
近年来，新一代铂类抗肿瘤药物草酸铂已被有效地应用于进展期大肠癌、肺癌、卵巢癌等恶性肿瘤的辅助化疗中。然而肿瘤患者个体对草酸铂的敏感性却迥然不同，耐药者与敏感者相比，生存期减少几倍甚至十几倍以上〔1〕。核苷酸切除修复交叉互补集团1(ERCC1)基因是DNA损伤修复途径中的重要基因。ERCC1在肿瘤组织的表达水平与草酸铂耐药性密切相关。近年来，随着药物遗传学的深入研究，评价ERCC1基因表达及其单核苷酸多态性(SNPs)与铂类抗肿瘤药物耐药的关联，己逐渐受到关注〔2〕。本研究通过Gateway定向克隆技术建立表达ERCC1蛋白的细胞系，提供体外研究ERCC1基因功能平台，通过细胞抑制率测定分析(SRB)，从草酸铂对细胞克隆群体的抑制水平评价草酸铂的细胞毒作用。
|
|
|
|
|
|
|
|
|
| 广告载入中... |
| 广告载入中... |
| 广告载入中... |
|
|
|
|
|
教育论文中心