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肠道致病菌多重PCR快速检测体系研究
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沙门菌属、志贺菌属、侵袭性大肠埃希菌、肠产毒素大肠埃希菌是常见的引起人类和动物细菌性痢疾和细菌性食物中毒的肠道致病菌,严重的危害着人类健康和牲畜的安全〔1〕。因此,建立一种快速、简便、准确、特异地检测方法具有重要意义。目前常见病原菌的检验方法存在着检测周期长、工作量大、所需试剂多,而且假阴性率高,灵敏度低,或假阳性率高,特异性差等缺点。PCR技术提供了理想的检测方法。本实验采用多重PCR方法,可在同一反应体系中检测不同的细菌,整个过程只需要2~3h,应用前景广阔。 1 材料与方法 11 实验菌株 肠炎沙门菌、阿柏丁沙门菌,鸡雏沙门菌,德尔比沙门菌、鼠伤寒沙菌,福氏志贺2a,福氏志贺2b,宋氏志贺菌,枸缘酸杆菌,变形杆菌,河弧菌,金黄色葡萄球菌,枯草芽孢杆菌(四川省疾病预防控制中心);产毒素大肠埃希菌C83921,产毒素大肠埃希菌C83902(中国兽医药品监察所);侵袭性大肠埃希菌(中国生物制品研究所)。 12 试剂 染料、缓冲溶液、TaqDNA聚合酶、dNTPs、核酸染料(GV)、琼脂糖、Marker等(北京塞百盛基因技术公司)。
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