| | | 微波辐照对大鼠海马COXI、IV基因表达影响
| | 药学毕业论文【关键词】 微波；海马；细胞色素C氧化酶；能量代谢
摘要：目的药学毕业论文 研究微波辐照后大鼠海马组织细胞色素C氧化酶(COX)亚基I、IV mRNA表达变化和对酶活性的药学毕业论文影响，探讨微波辐照对大鼠海马能量代谢影响的机制。方法 采用RT-PCR法检测微波辐照后海马组织COXI、IV mRNA水平，采用还原细胞色素C法和高效液相色谱法(HPIC)分别检测微波辐照后海马组织细胞色素C氧化酶活性和三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、一磷酸腺苷(AMP)含量。结果 微波辐照后，大鼠海马组织细胞色素C氧化酶活性和ATP含量明显降低，并与COXI、IV mRNA表达变化呈一致性。结论 微波辐照可影响大鼠海马COXI、IV mRNA表达而降低酶的活性，进而引起能量代谢障碍。
关键词： 微波；海马；细胞色素C氧化酶；能量代谢
Effect of microwave exposure on COXI and COXIV mRNA expression in hippocampus of rats
Abstract： Objective To study mRNA expression of cytochrome c oxidase (COX) subunit Ⅰ,Ⅳ and activity of cytochrome c oxidase in hippocampus of rats after microwave exposure,and to interpret the molecular mechanism of microwave exposure on the energy metabolism deficit in hippocampus of rats.Methods The expression of cytochrome c oxidase subunit Ⅰ and Ⅳ mRNA after microwave exposure was detected by RT-PCR.The content of adenosine triphosphate(ATP),adenosine diphosphate(ADP),adenosine monophosphate(AMP) and activity of cytochrome c oxidase in hippocampus were detected by high performance liquid chromatography (HPLC) and reduced cytochrome c methods respectively.Results Decreased activity of cytochrome c oxidase and content of ATP in hippocampus were found after exposure,cytochrome c oxidase subunit Ⅰ and Ⅳ mRNA was also downregulated.Conclusion Microwave irradiation can decrease the expression of COXI,Ⅳ mRNA and avtivity of COX,and further to induce energy metabolism deficit in hippocampus of rats.
Key words： microwave;hippocampus;cytochrome c oxidase;energy metabolism
现代生活与微波技术的应用密切相关，由此导致的环境污染问题已引起了广泛关注。本研究选择在细胞色素C氧化酶(COX)活性中起主要作用的催化亚基Ⅰ和调节亚基Ⅳ为观察指标，观察微波对COX活性和基因表达的影响，以期探讨微波辐照致大鼠海马能量代谢改变的分子机制。
1 材料与方法
11 材料 (1) 实验动物：健康雄性Wistar大鼠(第三军医大学动物室)，体重180～220g。(2) 分组：随机分为对照组、微波辐照组。辐照组具体分为辐照后即刻，3，6，12h 4个观察组，对照组及辐照各组均为12只大鼠，共60只。(3) 仪器：PCR仪(美国MJ公司)；凝胶成像系统(美国BIO-RAD公司)；Du 640紫外分光光度计(德国Beckman公司)；高效液相色谱仪(日本岛津公司)。(4) 试剂：COXI引物(上游：5′GCTGCTAATACTGGCAGTGAGA3′，下游：5′GCTTCGGAAACTGACTTGTACC3′，扩增片段约381 bp)；COXIV引物(上游：5′GGCAGCAGTGGCAGAATGTTGG3′,下游：5′ACAAGCGCAGTGAAGCCGATGA3′,扩增片段约364bp)；内参βactin(上游：5′TAAAGACCTCTATGCCAACACAGT3′,下游：5′CACGATGGAGGGGCCGGACTCATC3′，扩增片段约241bp)，所有引物由上海Sangon公司合成。ATPNa2、ADPNa2、Cytc(美国Sigma公司)。
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