| | | 脑海绵状血管瘤遗传家系永生细胞株的建立
| | 医学生暑期实践论文【关键词】 血管瘤,海绵状中枢神经系统；疱疹病毒4型,人；B淋巴细胞；细胞系
Establishment of immortal lymphoblastoid cell lines in a pedigree of cerebral cavernous malformations
【Abstract】 AIM: To establish immortal lymphoblastoid cell lines in a pedigree of cerebral cavernous malformations(CCM). METHODS: The cell lines were constructed by means of adding EpsteinBarr virus and Cyclosporine A onto peripheral B lymphocytes. RESULTS: We successfully established 7 immortal lymphoblastoid cell lines in the family, and 5 of them suffered from CCM. CONCLUSION: These immortal lymphoblastoid cell lines would preserve the unique genome of CCM.
【Keywords】 hemangioma, cavernous, central nevvous system; herpesvirus 4, human; B lymphocytes; Cell line
【摘要】 目的医学生暑期实践论文： 建立脑海绵状血管瘤家系永生细胞株. 方法： 利用EB病毒转化外周血B淋巴细胞，同时加入环孢霉素A的医学生暑期实践论文方法. 结果： 成功建立了该疾病家系7名成员永生细胞株，其中5名为患者. 结论： 脑海绵状血管瘤家系永生细胞株成功建立.
【关键词】 血管瘤，海绵状中枢神经系统；疱疹病毒4型，人；B淋巴细胞；细胞系
0引言
脑海绵状血管瘤(cerebral cavernous malformation, CCM)是一种常见的脑血管先天性发育异常疾病，在临床上可分为家族性遗传和散发性遗传两大类. 该病发病率高，病因复杂，对人危害很大，是医学和分子遗传学研究领域的热点之一［1］. 利用EB病毒(EpsteinBarr virus, EBV)转化外周血B淋巴细胞，使其成为能连续分裂永久生存的类淋巴母细胞(lymphoblastoid)，以进一步建立各种疾患者群的永生细胞株(immortalized cell lines)，可永久保存每种疾病个体的完整基因组，且基因组的生化和分子生物学特性不会发生变化，因而是进行细胞遗传学和分子遗传学研究极好的材料. 我们以EBV加环孢霉素A （cyclosporine A,CyA）的转化技术，对采自内蒙古左旗地区一个遗传性CCM家系外周血淋巴细胞进行了转化，成功建立了该家系7名成员（5名为患者）的永生细胞株，从而为永久保存该疾病遗传资源以及今后进一步研究该病的发病机制提供了可靠的实验材料.
1材料和方法
1.1材料RPMI1640（Gibco）, Hepes（Gibco）用去离子水配成1 mol/L的溶液，胎牛血清（FCS, Hyclone，美国），淋巴细胞分离液(天津)，环孢霉素A（Cyclosporine A, CyA，瑞士）用RPMI1640液稀释成0.2 g/L的储存液，植物细胞凝集素（phaseolus vulgaris, PHA, Gibco）用去离子水配成0.2 g/L的溶液，二甲基亚砜（Sigma），青、链霉素（双抗，宁夏启元药业）用去离子水配成10g/L的溶液，L谷氨酰胺（Sigma）用去离子水配成0.2 mol/L的溶液，非洲狨猴Ｂ958细胞株（购自中国科学院遗传与发育生物学研究所），37℃ CO2培养箱（Shellba,美国）等. 全培养液按照每1L含762 mL RPMI1640, 200 mL胎牛血清，16 mL Hepes, 12 mL L谷氨酰胺，以及10 mL双抗的比例配制；冻存液按950 mL/L胎牛血清和50 mL/L二甲基亚砜的比例配制，4℃保存备用.
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