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建立大鼠前庭器官体外培养模型及观察佛波酯作用下的超微结构变化
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【摘要】 目的: 建立大鼠前庭器官的原代体外培养模型,并通过透射电镜观察前庭上皮细胞在佛波酯(PMA)作用前后的超微结构变化. 方法: 无菌条件下取出生2 d大鼠的椭圆囊上皮,体外培养1~7 d;从第2日开始用倒置显微镜观察、照相,试验组加入PMA 30 min,2 h和6 h,固定, 透射电镜观察. 结果: 体外培养椭圆囊1 wk, 12 h时可见成纤维细胞沿移植物边缘游出,2 d后内皮细胞聚集,呈铺路石样,透射电镜观察细胞无肿胀,胞膜、胞核完整,线粒体嵴无肿胀,纤毛无脱落;PMA各试验组细胞形态正常,核糖体密集,高尔基体较前发达,内质网轻度扩张. 结论: 大鼠前庭器官体外培养方法可行,为今后进一步研究提供了实验模型. 【关键词】 毛细胞;前庭;器官培养技术;佛波醇酯类 在现代医学和生物学研究中已广泛应用了组织培养技术,它具有在体内研究中无法比拟的优点. 体外培养模型的建立克服了在体内研究中无法解决的难题,应用体外培养技术可拓宽内耳研究的范围,为研究耳聋细胞学的机制和治疗提供一个模型系统,并使体外条件下内耳的病理、生理及药理学研究能得以深入进行[1-3]. 我们在建立体外前庭器官培养模型的基础上,采用透射电镜技术观察在蛋白激酶C(protein kinase C, PKC)活化剂佛波酯(phorbol myristate acetate, PMA)诱导后的前庭上皮细胞超微结构的改变.
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