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外源性结缔组织生长因子对人肾小管上皮细胞转分化及细胞外基质合成的作用
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【摘要】 目的: 探讨外源性结缔组织生长因子(CTGF)在人肾小管上皮细胞转分化及细胞外基质合成中的作用. 方法: 将体外培养的人肾小管上皮细胞HK2分为三组:对照组;CTGF小剂量组(终浓度为2.5 μg/L);CTGF大剂量组(终浓度为20 μg/L). 用倒置显微镜观察细胞形态学变化;噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性;RTPCR检测HK2细胞E钙黏蛋白(Ecadherin),α平滑肌肌动蛋白(αSMA),纤连蛋白(FN)和胶原ⅠαmRNA水平的变化;免疫组织化学方法观察HK2细胞FN和胶原Ⅰ的表达. 结果: CTGF刺激使HK2 细胞由椭圆形变为梭形,同时促进HK2细胞增殖. 不同浓度的CTGF作用于HK2细胞48 h后,αSMA 和FN mRNA水平显著升高(P<0.05),E钙黏蛋白mRNA的表达显著下降(P<0.05);大剂量CTGF刺激HK2细胞48 h后胶原ⅠαmRNA水平显著升高(P<0.05). 小剂量CTGF组HK2 细胞胞质FN表达水平显著增加(P<0.05),大剂量CTGF组HK2细胞胞质表达FN和胶原Ⅰ均显著增加(P<0.05). 结论: CTGF在体外能够诱导人肾小管上皮细胞转分化,并促进FN的合成,大剂量的CTGF可以增加其胶原Ⅰ的合成.
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