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当前位置:教育论文中心首页--西医临床医学论文--纳米银胶标记的DNA电化学传感器制备及应用
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纳米银胶标记的DNA电化学传感器制备及应用

【西医临床医学论文】【摘要】 目的: 研究 一种新型的纳米银胶标记DNA电化学传感器的制备及 应用 。 方法 :通过将纳米银胶标记于人工合成的5'端-巯基修饰的寡聚核苷酸片段上,制成银胶DNA电化学探针。利用阳极溶出伏安法检测标记于DNA末端的Ag+,实现对特定序列DNA的测定。结果:经过实验条件的优化,测定DNA浓度在1.0×10-9~6.0×10-7 mol/L范围内呈良好的线性关系,检测限为5.0×10-10 mol/L。结论:该DNA电化学传感器响应快速、灵敏度高、稳定性好,适合于生物 分析 。
【关键词】 纳米银胶;电化学DNA传感器;杂交检测;阳极溶出法
生物样品中特定DNA序列的测定在生物医学领域具有重要意义[1],其结果可用于对遗传性和传染性疾病进行鉴别和检测。在众多的杂交检测方法中,放射性同位素标记法存在着放射性污染等弊端,而非放射性标记法如荧光、化学发光和生物素标记方法的检测仪器昂贵,难以实现自动化, 且标记过程繁琐复杂[2]。DNA电化学传感器因具有简便快速、不破坏测试样品、不受溶液颜色 影响 等优点,已逐渐成为分子生物学研究中直接进行DNA序列检测的方法之一[3,4]。银胶是一种纳米材料,银胶粒子粒径小,比表面积大,表面反应活性高,从而具有良好的催化活性[5,6]。本研究将纳米银胶标记于人工合成的5'端-巯基修饰的寡聚核苷酸片段上,制成了高灵敏度、高选择性DNA电化学传感器,实现了对特定序列DNA的检测。
1 材料和方法
1.1 仪器和试剂 CHI650B电化学分析仪(上海辰华仪器有限公司生产),原子力显微镜(Nanoscope Ⅲa,Digitao Instruments,Inc. Santa Barbara. CA),紫外-可见分光光度计(Varian,美国)。
人工合成的24个碱基的寡聚核苷酸片段(上海生工生物工程公司提供):
探针序列:5'-HS-(CH2)6-GAGCGGCGCAACATTTCAGGTCGA-3'
(SH-ssDNA)
互补靶序列:5'-
 
 
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