端粒酶逆转录酶启动子hTERT/U6嵌合启动子的siRNA 表达载体的肿瘤靶向性分析--西医学评职称论文

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端粒酶逆转录酶启动子hTERT/U6嵌合启动子的siRNA 表达载体的肿瘤靶向性分析

【西医学评职称论文】作者：姜习新，张鹏辉，涂植光，杨毅，刘靳波【摘要】目的：体外研究 siRNAEGFPhTERT/U6PTZU6+1表达载体在肿瘤细胞中的靶向性. 方法：常规培养稳定表达绿色荧光蛋白的肝癌SMMC7721细胞株（EGFP7721）和稳定表达绿色荧光蛋白的人正常成纤维细胞株HELF（EGFPHELF）. 以PTZU6+1质粒转染EGFP7721细胞和EGFPHELF细胞为空白质粒组，siRNAEGFPPTZU6+1质粒转染EGFP7721细胞和EGFPHELF细胞为实验对照组，将siRNAEGFPhTERT/U6PTZU6+1质粒转染EGFP7721细胞和EGFPHELF细胞作为实验组，用realtime SYBR Green PCR和Western Blot鉴定siRNAEGFPhTERT/U6PTZU6+1对两种细胞株的绿色荧光蛋白表达的影响 . 结果：正向和反向的重组质粒siRNAEGFPhTERT/U6PTZU6+1转染EGFPHELF细胞与空白质粒比较，EGFP 基因表达无差异（P＞0.05）, 而转染稳定表达绿色荧光蛋白的7721后仅反向的siRNAEGFPhTERT/U6PTZU6+1重组质粒抑制EGFP基因的表达（P＜0.01）. siRNAEGFPPTZU6+1质粒与空白质粒组比较，在 EGFP7721和 EGFPHELF细胞株间，EGFP基因的表达均具有统计学差异（P＜0.01）. 结论：反向插入的siRNAEGFPhTERT/U6PTZU6+1重组质粒在肿瘤细胞具有一定靶向性，为进一步探讨基因的靶向治疗奠定了基础.
【关键词】端粒酶逆转录酶；启动子；siRNA表达载体; 靶向性
　【Abstract】AIM: To study the tumortargeting potential of siRNAEGFPhTERT/U6PTZU6+1 expression vector in vitro. METHODS：He

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