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复元胶囊对软骨细胞凋亡P38丝裂原活化蛋白激酶信号传导通路的影响

【药学论文网】【摘要】 目的: 观察复元胶囊含药血清对体外培养软骨细胞凋亡及P38丝裂原活化蛋白激酶信号通路(P38MAPK)的 影响 . 方法 : 建立体外原代软骨细胞培养体系,制备复元胶囊含药血清,采用硝普钠(SNP)诱导软骨细胞凋亡,并用复元胶囊含药血清以及P38MAPK的特异阻断剂SB203580干预. 透射电镜观察软骨细胞凋亡的超微结构,流式细胞仪检测软骨细胞凋亡率的变化,比色法观察Caspase3活性变化,免疫印迹技术(Western Blot)检测磷酸化P38, P53蛋白表达水平. 结果: ① 电镜下可观察到典型的凋亡细胞形态;② 中药组软骨细胞凋亡率(29.18±0.81)%比模型组(39.73±0.55)%显著降低,中药+抑制剂组软骨细胞凋亡率(25.85±0.85)%也比抑制剂组(27.27±0.78)% 低,差异均具有统计学意义(P<0.01,P<0.05);③ 中药组凋亡执行因子Caspase3的活性为(1.69±0.31) μg/μL,低于模型组(2.78±0.19) μg/μL,中药+抑制剂组(0.95±0.06) μg/μL与抑制剂组(1.17±0.13) μg/μL比较,Caspase3的活性也降低,差异均具有统计学意义(P<0.01,P<0.05);④ 中药组pP38蛋白表达(0.84±0.06)与模型组(1.98±0.19)比较显著降低,差异有统计学意义(P<0.01);而中药+抑制剂组pP38表达(0.32±0.03)与抑制剂组(0.36±0.04)比较无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05);⑤ P53蛋白在中药组(2.78±0.34)表达明显降低,与模型组(5.50±0.54)比较,差异均有统计学意义(P<0.01);中药+抑制剂组(0.92±0.02)与抑制剂(1.41±0.09)组比较,P53蛋白表达也降低. 结论: 复元胶囊含药血清能通过抑制磷酸化P38表达、调节P38信号通路下游靶基因P53和凋亡执行因子Caspase3而抑制SNP诱导的软骨细胞凋亡
 
 
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