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对照检测病原体单细胞悬液的制作与保存
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【乙肝的西医治疗论文】作者:任兴昌,卢晴晴,陈洪勋【关键词】 病原体;单细胞悬液;染色The Preparation and Preservation of Single Cell Suspension of Pathogenic Key words:Pathogenic;Single cell suspension;Stain 病原体单细胞悬液有广泛的 应用 前景,尤其在临床实验、病理诊断中更是具有十分重要的作用。由于无论是机器操作还是手工操作均不能保证每张玻片的条件(如时间、剂量、效价程度或其他因素等)相同,到 目前 为止还没有设立真正意义上的对照的 方法 ,除少数试剂可于片中寻找自身对照外,部分结果阳性、阴性及阳性的度以及结果的准确性较难判定。而单细胞悬液的制作选择各种已知阳性组织、细胞以及病原体标本,制成可以长期保存的含有均匀分散的单细胞悬浮液体对照物质,在进行玻片实验时将相应的对照物质点、涂少许于玻片上,同实验对象一起进行实验,以建立真正的对照,判断的结果准确可靠。为此,我们对与病原体形态检测有关的对照物质的制作与保存做了一些 研究 探讨。 1 材料与方法 选择我院临床活检取自外阴及宫颈赘生物,10%甲醛固定的尖锐湿疣病例、白色假丝酵母菌培养物(光滑型1个培养皿、粗糙型2个培养皿)、外周血淋巴细胞培养物、肾小管上皮细胞培养物以及取自肾病变组织的肾结核各1例。均进行细胞分散,常规HE染色(即苏木精伊红染色)/Ziehl—Neelsen抗酸杆菌染色,经显微镜镜检后证明单细胞悬液在临床实验与病理镜检中的可行性。 1.1 试剂 由于实验对象的不同,实验所需试剂有所区别。通用试剂1:PBS缓冲溶液;通用试剂2:生理盐水(每整瓶生理盐水+肝素1支);通用试剂3:10%甲醛溶液;通用试剂4:HE染色剂;通用试剂5:保存液;外周血淋巴细胞培养物所需试剂:红细胞裂解液;外周血淋巴细胞培养物/肾小管上皮细胞培养物所需试剂:70%乙醇溶液;肾结核所需试剂:Ziehl—Neelsen抗酸杆菌染色剂;尖锐湿疣所需试剂:胶原酶Ⅱ。<
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