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银屑病中细胞凋亡相关基因bcl-2、Fas、bax的检测

关键词  银屑病、 bcl-2基因、 Fas基因、 bax基因。
  银屑病的医学毕业论文发病机理尚不明确,角质形成细胞异常增生和角化不全是银屑病的医学毕业论文主要病理改变,以往对这方面的研究主要集中在免疫学和生化学方面。近年来银屑病与细胞凋亡的关系逐渐受到越来越多学者的重视。国外有学者报道银屑病表皮中角质形成细胞凋亡异常增多。抑凋亡基因bcl-2和促凋亡基因Fas、bax是现今研究较多、较重要的几个细胞凋亡相关基因。为了探讨这几种基因在银屑病发病中的意义,我们采用免疫组化方法检测了银屑病中细胞凋亡相关基因bcl-2、Fas及bax。
1 材料和方法
  1.1标本来源:采用1994-1997年我院保存的石蜡包埋组织块。寻常型银屑病15例,其中男8例,女例;年龄11-68岁,平均年龄 29.13岁;均为进行期银屑病。6名正常人皮肤组织,皆取自皮肤外科行重睑术、面部美容切除术者的皮肤,石蜡包埋作为对照组。测定前先将石蜡包埋组织块作常规组织切片及HE染色,在光镜下核对诊断,证实其病理诊断无误方采用。
  1.2试剂:鼠抗人bcl-2单克隆抗体购自Dako公司,生物素化羊抗鼠单克隆抗体系华美生物制品公司产品。兔抗人Fas多抗、兔抗人bax多抗及链酶亲和素-生物素-过氧化酶复合物免疫组化试剂盒(简称SABC试剂盒)均购自武汉博士德生物工程公司。   
  1.3方法:载玻片用APES处理后干燥备用,切取4-5μm厚的石蜡切片,常规脱蜡水化。Bcl-2基因的检测参照ABC法稍加改进,阳性对照为正常淋巴结,阴性对照为不加一抗。Fas、bax基因的检测采用SABC法,阳性对照分别为武汉博士德生物工程公司提供的Fas、bax基因阳性对照片,阴性对照为不加一抗。 
 
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