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枸杞多糖对人食管癌细胞增殖的抑制作用及与Rb蛋白表达的关系
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【##西医 论文】作者：单铁英， 刘宇宁， 杨书良【摘要】 目的分析中药枸杞多糖(LBP)对食管癌细胞株TE13的生长抑制作用,探讨其诱导细胞凋亡和周期阻滞与Rb蛋白表达的关系。方法取对数生长期的人食管癌细胞TE13 ,接种于96孔培养板,分为实验组、阴性对照组和阳性对照组。实验组各孔加入不同浓度的LBP,阴性对照孔加入完全培养基,阳性对照孔加入化疗药物羟甲基喜树碱,应用MTT法检测LBP对TE13细胞的抑制作用;光镜下观察TE13细胞的形态学变化;流式细胞技术检测细胞凋亡率;免疫组化法检测TE13细胞经药物处理前后去磷酸化Rb蛋白表达的变化。结果LBP对TE13细胞增殖具有明显的抑制作用(P<0.01),其药物浓度越大,作用时间越长,抑制效应越强;LBP作用48 h时,对TE13细胞的半数抑制浓度( IC50) 为0.61 μg/ml。出现亚二倍体和凋亡峰(Ap);LBP能提高TE13细胞中Rb蛋白的表达(P<0.01)。结论LBP 能显著抑制TE13 细胞的增殖,促进其凋亡,其作用机制可能与CPP 提高Rb 蛋白的表达有关。
【关键词】 枸杞多糖; 食管癌; Rb 蛋白
枸杞多糖(Lycium barbarumpolysaccharides ,LBP) 是枸杞子的提取物,具有多种生物活性作用［1］及抗肿瘤功能［2］,并能诱导肿瘤细胞凋亡从而抑制其增殖［3］。我国是食管癌高发区,河北省的涉县和磁县等地是食管癌集中高发区,发病率和死亡率呈逐年升高趋势。LBP诱导食管癌细胞株TE13的凋亡及其机制尚未见报道。本文旨在探讨(LBP) 对食管癌细胞株TE13凋亡的影响及其可能机制，为食管癌的防治提供新的途径及实验依据。
1 材料与方法
1.1 材料人食管癌细胞株TE13 由本室提供。枸杞多糖由本校实验中心从宁夏优质枸杞子中分离提取，纯度超过99%。PI 染料、MTT试剂盒、SDS 购自美国Sigma 公司;胎牛血清购自杭州四季青生物工程材料有限公司;RPM
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