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高效液相法测定维生素 B原料药的含量
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【西药学本科毕业论文】维生素 B2，又名核黄素，为水溶性维生素，容易消化和吸收。 其功效为促进发育和细胞的再生，帮助消除口腔内、唇、舌的炎症以及增进视力，减轻眼睛的疲劳等。 目前维生素 B2的含量测定方法主要为紫外-可见分光光度法[1]和荧光分光光度法。 本文用 HPLC 法测定维生素 B2的含量[2-4]，并与紫外-可见分光光度法进行比较， 结果表明，HPLC 法快速、准确、灵敏度高、重现性好。
1 仪器与试药
1.1 仪器
Agilent1200 高效液相色谱仪 （四元泵 、柱温箱 、VWD 检测器、Agilent1200 工作站）；AG245 电子分析天平；UV-2450型紫外-可见分光光度仪。1.2 试药维生素 B2对照品（中国生物制品检定所，批号：0718-200004）；维生素 B2原料药（北京蓝健兴达工贸有限公司提供）；甲醇为色谱醇（美国 Merck 公司）；水为超纯水，其他试剂为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱为 Agilent ZORBAX SB-C18(150 mm×4.6 mm，3.5 μm)；流动相为甲醇－0.35%磷酸的 0.01 mol/L 庚烷磺酸钠溶液(26 ∶74) ； 检 测 波 长 267 nm ； 流 速 1.0 ml/min ； 柱 温 35℃ ；进样量为 20 μl，理论塔板数按维生素 B2峰计算，不得少于3 000。2.2 溶液的制备2.2.1 对照品溶液的制备 精密量取维生素 B2对照品 15 mg，置于 100 ml 棕色容量瓶中， 加水适量， 水浴加热使完全溶解，放冷，加水至刻度，摇匀，即得标准贮备溶液；精密量取标准贮备溶液 2 ml 置 50 ml 棕色容量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得标准对照品溶液。2.2.2 样品溶液的制备 精密量取维生素 B2原料药 15 mg，置于 100 ml 棕色容量瓶中， 加水适量， 水浴加热使完全溶解，放冷，加水至刻度，摇匀；精密量取 2 ml 置 50 ml 棕色容量瓶中，加水至刻
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