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卡介苗经TLR4介导对膀胱癌细胞株T739 NFκB p65活性影响
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【制药专业毕业论文】作者:危建安, 曾星, 韩凌, 黄羽【摘要】 目的: 探讨卡介苗(BCG)对膀胱癌细胞株T739 经Toll样受体介导的NFκB p65活性影响。方法: 采用SYBR Green嵌合荧光定量Real TimePCR, 观察BCG(0.25g/L)刺激T739后不同时间点各个mRNA相对表达量(Ratio), 设LPS和空白组作对照; 采用转录因子结合DNA的ELISA方法检测NFκB p65活性。结果: BCG刺激后T739细胞TLR2、CD14和MD2 mRNA表达均明显增加, Max.Ratio分别为5.3(2 h), 2.6 (4 h), 7.4(2 h), TLR4 mRNA增加不显著, Max.Ratio为1.6(6 h); BCG作用T739细胞后NFκB p65活性显著增加, 阻断TLR4后,NFκB p65活性受到显著抑制(P<0.05); 阻断TLR2后NFκB p65活性却显著性增强(P<0.01)。结论: BCG作用T739后TLR2、CD14、MD2 和TLR4 mRNA表达均不同程度增加, BCG可经TLR4使T739细胞NFκB p65活性增强, 不是经TLR2使T739细胞NFκB p65活化。 【关键词】 卡介苗; 膀胱癌; 信号转导; 核转录因子κB p65 卡介苗(bacillus CalmetteGuérin, BCG)膀胱内灌注治疗和预防浅表性膀胱癌, 是目前较成功的肿瘤免疫治疗。其作用认为与BCG诱导并增强了免疫反应尤其是局部的细胞免疫有关, 但尚不能完整阐释其机制。天然免疫的研究发现[1]: 上皮、内皮细胞等可通过其表面的Toll样受体(tolllike receptors, TLRs)识别与其接触的病原微生物, 产生免疫反应。我们推测BCG也可能刺激膀胱移行上皮细胞TLRs, 通过激活Toll信号转导通路而增强抗肿瘤免疫反应。因此本研究拟用BCG刺激膀胱癌细胞株T739, 探讨其对Toll信号转导相关膜分子TLR2、TLR4、CD14和MD2
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