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国产石蜡制作组织微阵列的探索及应用评价
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【乙肝的西医治疗论文】作者：蒋会勇，张三泉，张进华，陈愉，赵彤【关键词】 组织病理学【关键词】 组织微阵列；组织病理学；组织芯；原位杂交1方法
1．1组织微阵列蜡块的制作利用病理科常用的国产石蜡（茂名市顺和蜡厂，溶点60℃）制作空白蜡块作为受体蜡块，选择南方医院病理科存档的石蜡包埋组织作为供体蜡块. 首先对供体蜡块组织的HE切片作形态学观察，选择有代表性的区域，在相应位置进行标记；然后使用组织微阵列仪（Beecher Instruments, MTA1）制作组织微阵列. 根据原有切片标记部位，用供体针在蜡块相应部位取组织芯，其直径为0.6 mm. 将供体组织芯放入受体蜡块，每例标本在标记区域内取2条组织芯，在组织样本填入蜡孔时记录每个样本在二维阵列中的具体位置，并在一定位置上标记出组织微阵列的方位(图1).
1．2组织微阵列切片的制作将蜡块制好后进行切片，常面临的问题是组织的脱落. 在切片前，将石蜡组织在45℃烤箱中烤1 h，至石蜡变软，且形状没有改变为止. 用一个干净的载玻片将其表面压平,同时用玻片将石蜡从四周向中心轻轻挤压，使石蜡与组织充分接触，但不能用力过大而使组织陈列中间凸起. 处理后的阵列块即可以用于切片. 切片前置-20℃冰箱中冷冻30 min.
1．3组织微阵列切片的染色及观察HE染色：大肠组织标本制作的组织芯片按病理常规制作切片,进行HE染色. 免疫组织化学染色：采用标准的SP法，进行免疫组织化学染色，DAB显色. mRNA原位杂交：利用PCR法扩增并纯化354 bp的KIAA1173基因片段，纯化后的cDNA目的片段用Roche公司的DIG DNA labeling and Detection Kit进行随机引物地高辛标记探针. mRNA原位杂交按照武汉博士德生物公司Enhanced Sensitive ISH Detection Kit Ⅰ操作程序进行.
1．4全组织切片的染色与组织微阵列切片的染色的评价在进行组织微阵列的实验前，先对全组织切片进行免疫组织化学染色及mRNA原位杂交，以评价
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