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水溶性阳离子荧光共轭聚合物作为荧光探针测定三磷酸腺苷
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【药学论文网】作者:王运 王伟 何治柯关洪亮【摘要】 利用荧光光谱研究了三磷酸腺苷(ATP)与水溶性阳离子荧光共轭聚合物的相互作用,发现加入ATP后,聚合物的荧光强度被显著猝灭,且猝灭程度与ATP的加入量成正比,据此建立了测定ATP的方法。荧光光谱的激发波长选择395 nm,发射波长为521 nm,激发狭缝宽度为10.0 nm,发射狭缝宽度为10.0 nm。在0.05 mol/L TrisHCl缓冲溶液(pH=7.4)中,测定ATP的线性范围为8.0×10-8~1.0×10-5 mol/L; 检出限为2.0×10-8 mol/L; 回收率在93.6%~105.6%之间; 相对标准偏差在2.2%~6.9%之间。本方法用于三磷酸腺苷二钠药片和鲫鱼肉中ATP的测定,获得满意结果。 【关键词】 荧光共轭聚合物;荧光光谱;三磷酸腺苷二钠 1 引 言 三磷酸腺苷(ATP)是生物体中重要的能量物质[1],建立快速、简便监测ATP的方法对于深入研究其功能具有重要意义。目前,测定ATP含量的方法主要有电化学分析法[2]、生物发光法[3]、高效液相色谱法[4]、毛细管区带电泳法[5]及荧光光谱法[6]等。但电化学分析法、生物发光法、毛细管区带电泳法和高效液相色谱法存在仪器昂贵、操作繁琐等缺点,而ATP检测试剂盒价格较高, 试剂保存条件苛刻,不利于反复使用。虽然检测ATP的方法在不断改进,但灵敏度和选择性仍然难以满足实际需要。荧光光谱法具有操作简便、灵敏度高、选择性好等特点,作为荧光探针的有小分子[7]、聚合物[8]及量子点等[9]。水溶性荧光共轭聚合物作为一类新型荧光探针具有摩尔吸光系数大、荧光量子产率高等优点,还具有“分子导线”的功能,能够实现荧光信号的放大,常用于生物大分子和生物小分子的检测等[10~13]。 本实验采用的水溶性阳离子荧光共轭聚合物(WCFP)属于一种聚噻吩衍生物。噻吩是五元环结构,符合休克尔规则,具有适中的能隙、较宽的光谱响应、良好的环境稳定性和热稳定性,是一类性能优异的π电子系共轭光、
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