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小菜蛾幼虫全长cDNA文库的构建及序列分析
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【儿科护理工作总结论文】摘 要：以小菜蛾为材料，用SMART技术构建了小菜蛾2龄幼虫全长cDNA文库，对文库的部分序列进行测序及分析，结果表明该文库原始库容达到1.1×106，扩增库容达到2.6×109，重组率达到92%，平均插入片段大小为1kb左右，文库质量达到要求。序列分析得到了小菜蛾的部分新基因，对第11号基因(GenBank登录号：GU014922)表达产物的结构分析预测表明该基因可能为丝氨酸蛋白酶家族基因的一个新成员，参与小菜蛾体内重要的代谢、免疫反应。该文库的构建为进一步研究小菜蛾功能基因奠定了基础。
关键词：小菜蛾；全长cDNA文库；EST序列；序列分析；丝氨酸蛋白酶
小菜蛾（Plutella xylostella）属鳞翅目菜蛾科昆虫，主要为害十字花科蔬菜，给农业造成严重损失。小菜蛾繁殖力很强，每年发生数代甚至数十代，加之化学农药的大量施用，因此抗药性发展特别快（罗雁婕等,2008）。而现有的生物农药对小菜蛾的防治效果也不是十分理想，尤其对于老熟幼虫期以后的害虫药效差、击倒速度慢等也是当前部分生物农药存在的问题（李高平等，2006）。未来杀虫剂的开发研制越来越趋向于依靠分子生物学技术的发展创新，通过研究目标害虫的功能基因从而找到适合的靶标，研制出针对性更强、效果更好的新型生物农药或对环境友好、高效低毒的化学农药（郑冬梅,2006；邱德文,2007）。而cDNA文库是发现新基因和研究基因功能的基础工具，本研究拟利用SMART技术，构建小菜蛾2龄幼虫全长cDNA文库，为研究与小菜蛾抗性形成、免疫等相关的重要的功能基因打下基础。
1 材料和方法
1.1 材料和试剂：
1.1.1 材料：小菜蛾成虫捕捉于重庆地区蔬菜地，在实验室条件下饲养两代，取2龄幼虫作为供试材料。
1.1.2 主要试剂：Creator SMART cDNA Library Construction Kit 购自Clontech公司，TRIZOL试剂、T4 DNA连接酶购自Invitrogen公
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