摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4页 |
缩略词 | 第6-9页 |
第一章 绪论 | 第9-19页 |
1.1 尼古丁的理化性质 | 第9页 |
1.2 环境中尼古丁来源及其危害 | 第9-12页 |
1.2.1 环境中尼古丁污染物来源 | 第9-11页 |
1.2.2 尼古丁危害及处理 | 第11-12页 |
1.3 微生物代谢尼古丁的研究进展 | 第12-14页 |
1.4 微生物代谢尼古丁中尼古丁氧化酶研究进展 | 第14-19页 |
1.4.1 6-羟基-L-尼古丁氧化酶(6-HLNO) | 第14-16页 |
1.4.2 6-羟基-D-尼古丁氧化酶(6-HDNO) | 第16-17页 |
1.4.3 假单胞菌属中尼古丁氧化酶NicA与NOX | 第17-19页 |
第二章 菌株S16尼古丁代谢差异表达蛋白相关基因转录水平的研究 | 第19-33页 |
2.1 引言 | 第19-21页 |
2.2 材料与方法 | 第21-25页 |
2.2.1 实验材料 | 第21-22页 |
2.2.2 实验方法 | 第22-25页 |
2.3 结果与讨论 | 第25-31页 |
2.3.1 总RNA提取和DNaseI处理后结果 | 第25-26页 |
2.3.2 半定量PCR | 第26-27页 |
2.3.3 RT-qPCR结果 | 第27-31页 |
2.4 本章小结 | 第31-33页 |
第三章 恶臭假单胞菌S16中尼古丁氧化酶鉴定与功能研究 | 第33-59页 |
3.1 引言 | 第33页 |
3.2 材料与方法 | 第33-40页 |
3.2.1 实验材料 | 第33-34页 |
3.2.2 实验方法 | 第34-40页 |
3.3 结果与分析 | 第40-58页 |
3.3.1 NicA2(PPS_4081)蛋白氨基酸序列分析 | 第40-41页 |
3.3.2 菌株S16中pps_4081(nicA2)基因敲除结果与分析 | 第41-47页 |
3.3.3 基因nicA2体外克隆表达及功能检测 | 第47-53页 |
3.3.4 NicA2蛋白理化性质初步探究 | 第53-58页 |
3.4 本章小结 | 第58-59页 |
第四章 恶臭假单胞菌S16中假氧化尼古丁氧化酶功能鉴定 | 第59-73页 |
4.1 引言 | 第59页 |
4.2 材料与方法 | 第59-63页 |
4.2.1 实验材料 | 第59-60页 |
4.2.2 实验方法 | 第60-63页 |
4.3 结果与讨论 | 第63-71页 |
4.3.1 PCR验证菌株S16中基因pnao敲除结果 | 第63页 |
4.3.2 敲除株S16dpnao生长体系状态 | 第63-66页 |
4.3.3 敲除回补株S16dpnaoC生长体系状态 | 第66-67页 |
4.3.4 敲除株S16dpnao休止细胞反应降解尼古丁 | 第67-68页 |
4.3.5 蛋白Pnao氨基酸序列分析及异源表达 | 第68-71页 |
4.4 本章小结 | 第71-73页 |
结论与展望 | 第73-75页 |
参考文献 | 第75-81页 |
附录1 实验仪器 | 第81-83页 |
附录2 实验试剂 | 第83-85页 |
附录3 NicA2和Pnao氨基酸序列比对结果 | 第85-87页 |
致谢 | 第87-89页 |
攻读硕士学位期间论文发表情况 | 第89-91页 |